Apelin對大鼠坐骨神經(jīng)切斷后脊髓前角神經(jīng)元凋亡的影響.pdf

1、目的：探討坐骨神經(jīng)切斷縫合術(shù)后斷端注射apelin蛋白對脊髓前角細(xì)胞凋亡的影響，為進(jìn)一步了解apelin蛋白在阻止脊髓繼發(fā)性損傷中的作用提供研究基礎(chǔ)。
　　 方法：建立大鼠坐骨神經(jīng)切斷縫合術(shù)動(dòng)物模型。坐骨神經(jīng)切斷術(shù)中神經(jīng)縫合后套入硅膠管內(nèi)（內(nèi)徑1.0mm，管長1.0cm），硅膠管遠(yuǎn)端及縫合處用凡士林封固，A組（實(shí)驗(yàn)組）于硅膠管內(nèi)注入apelin蛋白30μl，B組（對照組）于硅膠管內(nèi)注入0.9％生理鹽水30μl。A、B組大鼠各為2

2、4只。于術(shù)后4h、8h、24h、72h、7d、14d6個(gè)時(shí)相點(diǎn)取材，切取L4-6脊髓。標(biāo)本按常規(guī)固定、脫水、切片、切片厚度為5μm，每隔20張取1張切片，每個(gè)標(biāo)本取10張。應(yīng)用蘇木精-伊紅染色及凋亡細(xì)胞原位末端標(biāo)記(TUNEL)法行脊髓細(xì)胞凋亡檢測。
　　 結(jié)果：⑴A組在術(shù)后4h脊髓前角發(fā)現(xiàn)少量的TUNEL陽性細(xì)胞的表達(dá)，術(shù)后8h開始見到有典型的凋亡神經(jīng)元，表現(xiàn)為核固縮，染色質(zhì)濃縮，或形成不規(guī)則碎塊，呈黃色熒光；到術(shù)后24h，凋

3、亡細(xì)胞數(shù)增加，達(dá)到高峰，特別是大量膠質(zhì)細(xì)胞凋亡；術(shù)后72h至7d凋亡的神經(jīng)元細(xì)胞和膠質(zhì)細(xì)胞均逐漸減少，出現(xiàn)不同階段的不典型凋亡細(xì)胞，可見少量毛細(xì)血管增生，術(shù)后14d仍可見少量凋亡細(xì)胞；同時(shí)可見各時(shí)相點(diǎn)脊髓神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的凋亡比神經(jīng)元的凋亡明顯增多，實(shí)驗(yàn)組脊髓前角神經(jīng)元凋亡數(shù)比對照組明顯減少。⑵B組術(shù)后4h脊髓神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞和脊髓前角神經(jīng)元都出現(xiàn)了不同程度的細(xì)胞凋亡（細(xì)胞核內(nèi)有棕黃色深染顆粒，未見典型的凋亡小體），術(shù)后8h至24h，B組的陽性