新生鼠面神經(jīng)切斷后GDNF對(duì)運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元的保護(hù)作用.pdf

1、為探討靶源性(骨骼肌)以外來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子之一,膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)在體內(nèi)的作用,該實(shí)驗(yàn)借助于華盛頓大學(xué)醫(yī)學(xué)院神經(jīng)病學(xué)系Dr.Parsadanian AS實(shí)驗(yàn)室通過GFAP啟動(dòng)子,成功獲得的GDNF在小鼠星型膠質(zhì)細(xì)胞過度表達(dá)的GFAP-GDNF轉(zhuǎn)基因品轉(zhuǎn)基因鼠為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,以出生2天小鼠面神經(jīng)切斷為模型,從如下三個(gè)方面來研究周圍神經(jīng)損傷后GDNF對(duì)運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元的保護(hù)作用及機(jī)制:一、為證實(shí)在中樞來源(而不是通過全身途徑)的G

2、DNF是否促進(jìn)運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元的存活,檢測(cè)了新生2天小鼠面神經(jīng)切斷后一周面神經(jīng)核尼氏染色和運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元計(jì)數(shù),觀察到GFAP-GDNF轉(zhuǎn)基因鼠約有90﹪運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元在損傷后存活.二、為檢驗(yàn)面神經(jīng)切斷后GDNF促進(jìn)運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元的存活是否與抑制損傷后運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元的細(xì)胞凋亡有關(guān),該實(shí)驗(yàn)對(duì)比檢測(cè)了野生鼠和GFAP-GDNF轉(zhuǎn)基因鼠損傷后面神經(jīng)核團(tuán)神經(jīng)元的caspase-3激活情況.結(jié)果表明GDNF幾乎能完全抑制由損傷誘導(dǎo)的運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元的caspase-3的激活,

3、從而抑制了細(xì)胞調(diào)亡,促進(jìn)運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元的存活.三、為進(jìn)一步確定GDNF對(duì)運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元的保護(hù)作用,檢測(cè)了面神經(jīng)切斷后運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元的標(biāo)志物之一膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶(ChAT)的表達(dá)情況.結(jié)果表明,因?yàn)镚DNF持續(xù)性表達(dá)而存活的運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元,其功能活性亦得到了很好的維持.該實(shí)驗(yàn)提示:中樞神經(jīng)系統(tǒng)產(chǎn)生的GDNF會(huì)顯著促進(jìn)運(yùn)動(dòng)神經(jīng)切斷后其中樞內(nèi)運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元的長(zhǎng)時(shí)期存活,并能極好地保護(hù)這些神經(jīng)元的基本功能.該作用的途徑之一是與GDNF能夠明顯地抑制損傷后神經(jīng)元的細(xì)胞