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文檔簡介
1、背景與目的:免疫性血小板減少癥(immune thrombocytopenia, ITP)是一種以外周血中血小板減少為特征的獲得性自身免疫紊亂性疾病,血小板生成受損及T淋巴細胞亞群失衡介導的免疫紊亂在其復雜的發(fā)病機制中起著重要的作用。輔助性T(Th)細胞的缺陷致使自身反應性B細胞活化并分泌IgG型抗血小板自身抗體,最終導致血小板在單核-巨噬細胞系統(tǒng)中被破壞。其中,脾臟作為人體最大的淋巴器官,是自身反應性B細胞活化,抗血小板自身抗體產生以
2、及血小板破壞的主要場所,脾切除術是目前治療慢性ITP的有效措施,其有效率為66%左右?,F(xiàn)有研究證明,慢性ITP是一種以Th細胞異常聚集為特征的Th1優(yōu)勢性疾病。Th1型趨化因子受體CXCR3,CCR5以及Th2型趨化因子受體CCR3在系統(tǒng)性紅斑狼瘡及類風濕性關節(jié)炎等自身免疫性疾病中的表達已有研究,證實在Th1優(yōu)勢性疾病中Th1型趨化因子受體表達增多。初步研究表明在ITP患者外周血中也存在著趨化因子受體表達的異常,但ITP患者脾臟中趨化因
3、子受體CXCR3,CCR5及CCR3的表達情況卻鮮有報道。
本研究旨在觀察ITP脾臟的病理學形態(tài)特征,用免疫組化、蛋白印跡及實時熒光定量聚合酶鏈式反應(real-time PCR,RT-PCR)檢測ITP患者脾臟中Th1型趨化因子受體CXCR3,CCR5以及Th2型趨化因子受體CCR3蛋白及基因水平的表達情況及其臨床意義。
方法:收集24例ITP患者的脾臟標本作為病例組,18例創(chuàng)傷性脾破裂患者脾切除的脾臟標本
4、作為對照組。通過HE染色法來觀察ITP脾臟的病理學形態(tài)。用免疫組化SP法檢測CXCR3,CCR5及CCR3在ITP患者脾臟中的陽性表達率,分別用western blot法和RT-PCR法檢測CXCR3,CCR5及CCR3在ITP患者脾臟中的蛋白和mRNA表達水平。
結果:ITP患者脾臟的形態(tài)學特征表現(xiàn)為白髓濾泡反應性增生,生發(fā)中心擴大,濾泡邊緣帶增厚,中央動脈管壁增厚、纖維化,毛細血管密度增加。脾竇擴張、淤血,紅髓中可見中
5、性粒細胞的浸潤,脾索可見吞噬紅細胞和血小板的巨噬細胞浸潤。ITP患者脾臟中Th1型趨化因子受體CXCR3和CCR5的陽性率為(90%、100%)均高于對照組(75%、87.5%)(P值均<0.05),Th2型趨化因子受體CCR3陽性率為50%,低于對照組(62.5%)(P<0.05);Western blot結果顯示ITP患者脾臟中CXCR3和CCR5表達增多,CCR3表達減少;同時,CXCR3和CCR5 mRNA水平表達增多,CCR3
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