增食欲素受體1在營(yíng)養(yǎng)性肥胖大鼠腎上腺中的表達(dá)及其與肥胖相關(guān)性的研究.pdf

1、肥胖是一種以體脂沉積過(guò)多和分布異常為特征的內(nèi)分泌代謝病，不僅是導(dǎo)致心腦血管疾病的高危因素，也增加糖尿病、高血壓、高脂血癥、脂肪肝以及癌癥等疾病的發(fā)病率，還帶來(lái)了很多社會(huì)問(wèn)題和心理問(wèn)題。與肥胖相關(guān)的因素很多，增食欲素(orexin)是其中重要的一個(gè)因素。Orexin在中樞系統(tǒng)研究較多，而在腎上腺中研究的較少，已有研究證實(shí)orexin系統(tǒng)能調(diào)節(jié)下丘腦-垂體-腎上腺(HPA)軸，促進(jìn)醛固酮、糖皮質(zhì)激素、兒茶酚胺的分泌及腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞的生長(zhǎng)等，

2、從而與肥胖的發(fā)生有關(guān)。目前國(guó)內(nèi)外關(guān)于增食欲素受體與營(yíng)養(yǎng)性肥胖關(guān)系的研究較少。因此，本課題將研究重點(diǎn)確定為增食欲素受體1在營(yíng)養(yǎng)性肥胖大鼠腎上腺中的表達(dá)，側(cè)腦室注射OX1R反義的硫代磷酸化-脫氧寡核苷酸(OX1R-PS-ODNs)對(duì)肥胖大鼠體重、血脂、血糖、胰島素水平的影響，為這一代謝綜合癥核心因素的發(fā)病與防治提供理論基礎(chǔ)。
　　 目的:
　　 探討營(yíng)養(yǎng)性肥胖大鼠腎上腺皮質(zhì)組織中增食欲素受體1(OX1R)的表達(dá)規(guī)律，以及下丘

3、腦增食欲素(orexin)系統(tǒng)對(duì)其調(diào)節(jié)作用。
　　 方法:
　　 1、高脂飲食喂養(yǎng)成年雄性Wistar大鼠8周誘導(dǎo)肥胖動(dòng)物模型；觀察大鼠體重、Lee's指數(shù)、腹內(nèi)脂肪、血甘油三酯、總膽固醇、空腹血糖、胰島素等指標(biāo)。免疫組化法檢測(cè)腎上腺皮質(zhì)組織中OX1R的表達(dá)。
　　 2、側(cè)腦室注射OX1R反義的硫代磷酸化-脫氧寡核苷酸(OX1R-PS-ODNs)干預(yù)下丘腦增食欲素系統(tǒng)，觀察大鼠體重、Lee's指數(shù)、腹內(nèi)脂肪、血甘

4、油三酯、總膽固醇、空腹血糖、胰島素等指標(biāo)，分析腎上腺皮質(zhì)中OX1R的變化規(guī)律。
　　 3、微型血糖儀測(cè)血糖，生化酶法測(cè)定血清甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)及高密度脂蛋白(HDL)，化學(xué)免疫法測(cè)定血清胰島素水平，應(yīng)用免疫組化方法檢腎上腺OX1R的表達(dá)。
　　 結(jié)果:
　　 1、大鼠高脂飲食飼養(yǎng)8周后，高脂肥胖組大鼠體重、Lee's指數(shù)、腹內(nèi)脂肪、血甘油三酯、總膽固醇、空腹血糖、胰島素顯著

5、高于正常對(duì)照組(P＜0.01)；高脂非肥胖組大鼠體重較正常對(duì)照組無(wú)顯著性差異，但腹內(nèi)脂肪、甘油三酯、總膽固醇、空腹血糖和胰島素較正常對(duì)照組顯著增加，但與高脂肥胖組無(wú)明顯差異。
　　 2、OX1R蛋白表達(dá)定位于大鼠腎上腺皮質(zhì)束狀帶細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中；與正常對(duì)照組相比，高脂肥胖組和非肥胖組大鼠腎上腺皮質(zhì)中的OX1R的表達(dá)升高(P＜0.01)，且OX1R的表達(dá)量與Lee's指數(shù)、空腹血糖、胰島素、甘油三酯呈顯著負(fù)相關(guān)，r分別為-0.829

6、(P＜0.01)、-0.710(P＜0.05)、-0.801(P＜0.01)及-0.733(P＜0.01)。
　　 3、OX1R-PS-ODNs干預(yù)下丘腦orexin系統(tǒng)2天后，肥胖反義組大鼠體重、血脂、空腹血糖及胰島素較肥胖錯(cuò)義組及肥胖鹽水組均下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01、P＜0.05)，肥胖鹽水組與肥胖錯(cuò)義組比較差異無(wú)顯著性，肥胖反義組附睪脂肪較肥胖鹽水組有所下降(P＜0.05)。
　　 4、肥胖反義組大鼠腎

7、上腺皮質(zhì)OX1R表達(dá)量(OD值為16.02±2.56)較肥胖錯(cuò)義組(OD值為28.95士2.10)低43.9％、較肥胖鹽水組（OD值為30.69士2.02）低47.8％，肥胖反義組與兩組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。
　　 結(jié)論:
　　 1、高脂飲食可成功誘導(dǎo)營(yíng)養(yǎng)性肥胖大鼠模型，具有體重、腹內(nèi)脂肪含量明顯增加，血甘油三酯、總膽固醇、空腹血糖、胰島素顯著升高等特點(diǎn)。
　　 2、大鼠腎上腺皮質(zhì)束狀帶細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中