大白菜溫度敏感細胞質(zhì)雄性不育系同工酶分析.pdf

1、　　本實驗通過對大白菜細胞質(zhì)雄性不育系CMS3411-7，CMS7311及其保持系的同工酶進行了比較研究分析，為探究其溫敏型雄性不育和育性轉(zhuǎn)化的內(nèi)在機理提供必要的線索。　　論文分別對兩套不育系及相應(yīng)的保持系6葉苗期葉片和根、花期花蕾的POD(過氧化物)同工酶、EST(酯酶)同工酶、ATPase(腺苷三磷酸酶)同工酶、AMY(淀粉酶)同工酶進行了垂直不連續(xù)聚丙烯酰胺凝膠電泳分析。對經(jīng)9℃左右低溫誘導(dǎo)、3000lux光照條件下生長的CMS

2、7311育性轉(zhuǎn)化(不育變可育)及回復(fù)(育性又由可育轉(zhuǎn)變成處理前的不育態(tài))整個過程進行了連續(xù)取樣及花器育性觀察，追蹤β-EST同工酶隨雄蕊育性轉(zhuǎn)化的動態(tài)變化過程。并進一步對與雄蕊育性密切相關(guān)的特異酶帶進行了回收、測序。取得了以下主要結(jié)果：　　1通過對不育系CMS3411-7、CMS7311及其保持系不同器官多種同工酶的比較研究，認為花蕾的酯酶同工酶與大白菜雄蕊的育性表達及轉(zhuǎn)化有密切關(guān)系?！　?初步發(fā)現(xiàn)大白菜小花蕾中Rf為0.718、0

3、.742的β-EST同工酶酶帶的消失與CMS7311和CMS3411-7雄性不育性關(guān)系密切?！　?首次發(fā)現(xiàn)小花蕾(小于1.5mm)中Rf為0.759的β-EST同工酶酶帶的出現(xiàn)與溫度敏感不育系的育性轉(zhuǎn)化關(guān)系十分密切。　　4通過SDS分析發(fā)現(xiàn)，Rf為0.718、0.742和0.759的EST同工酶分子量均為14KD的蛋白質(zhì)，初步判斷它們可能有相似的核心亞基結(jié)構(gòu)?！　?建立了適合大白菜同工酶回收的簡便方法，用電洗脫法對凝膠中的酯酶進行