大白菜雄性不育系RC7不育性及不育相關(guān)基因克隆與分析.pdf

1、在大白菜新品種培育中，細(xì)胞質(zhì)雄性不育系是生產(chǎn)雜交一代的理想親本系。柯桂蘭，趙利民等1997年從國外引進(jìn)新型甘藍(lán)型油菜胞質(zhì)雄性不育材料RC97-1，以其作為不育源，與不同類型大白菜雜交、多代回交轉(zhuǎn)育其不育性，從幼苗、花期到經(jīng)濟(jì)性狀各階段連續(xù)嚴(yán)格篩選，育成了不育性穩(wěn)定、幼苗無黃化、蜜腺正常、配合力好，不育株率及不育度均達(dá)100％的大白菜胞質(zhì)雄性不育系RC7，并利用RC7選育出優(yōu)勢明顯、符合市場需求的大白菜新品種“金秋70”和“金秋90”，供

2、生產(chǎn)上應(yīng)用。為了明確不育系RC7花粉敗育的機(jī)理，本試驗(yàn)試圖從解剖學(xué)和分子生物學(xué)方面探索RC7不育形成的機(jī)理，為進(jìn)一步利用這一優(yōu)良不育源提供科學(xué)依據(jù)。 1.對RC7的花期花蕾和開放花朵采用石蠟切片的方法，進(jìn)行形態(tài)解剖學(xué)分析發(fā)現(xiàn)，RC7花蕾出現(xiàn)敗育，其敗育發(fā)生在四分體時(shí)期，此時(shí)RC7絨氈層細(xì)胞異常肥大，四分體受到擠壓后破裂并降解，無法形成正常的小孢子。 2.在RC7 mtDNA中擴(kuò)增出一長度為417bp的特異片斷，在其保持系

3、B7中沒有該片斷。該特異片斷與orf138同源性為100％。這一結(jié)果證明RC7的不育性與Ogu CMS不育系具有相似性，它的不育性來源于Ogu CMS蘿卜不育源。 3.以RC7 mtDNA為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增，擴(kuò)增出大小為588bp的特異條帶。在其保持系B7中沒有該條帶。該片段可編碼75個(gè)氨基酸，命名為orf75。orf75推導(dǎo)的氨基酸序列N末端與蘿卜Ogu CMS所具有的ORF138有28個(gè)氨基酸完全相同；C末端與鉀依賴鈉鈣交