紅心杉組織培養(yǎng)及微扦插繁育技術(shù)的研究.pdf

1、本試驗(yàn)以廣西紅心杉產(chǎn)地的優(yōu)良紅心杉單株（分別記為Y1和Y2）為組培材料，探索廣西種源紅心杉無性系的組培快繁技術(shù)，研究紅心杉無性系外植體啟動(dòng)培養(yǎng)條件及外部因子對(duì)紅心杉無性系組培苗增殖的影響，篩選紅心杉無性系試管苗生根培養(yǎng)基及外源添加物的種類及濃度，優(yōu)化紅心杉無性系組培苗微扦插培養(yǎng)條件，分析紅心杉無性系組培各階段的生理指標(biāo)與組培效果的關(guān)系，主要研究結(jié)果如下:
　　1.0.1％升汞6 min及MS+6-BA1.0mg/L+IBA0.3m

2、g/L是紅心杉較適宜外植體消毒方式及誘導(dǎo)培養(yǎng)基。采用0.1％升汞處理6 min，污染率較低，為35％，且外植體褐化程度較小;以MS+6-BA1.0mg/L+IBA0.3mg/L為外植體誘導(dǎo)培養(yǎng)基，外植體萌芽率均為13.33％。隨著處理時(shí)間的增加，外植體內(nèi)總酚含量及PPO活性分別增加、降低，Y1的褐化程度較Y2嚴(yán)重，處理時(shí)間越長其褐化越嚴(yán)重，Y2的抗褐化能力較Y1好。
　　2.不同紅心杉無性系其適宜增殖（繼代）培養(yǎng)基不同，應(yīng)根據(jù)不同

3、無性系選擇適宜的生長調(diào)節(jié)劑及其使用濃度;遮光不利于紅心杉組培苗葉綠素的積累;有無遮光對(duì)其組培苗褐化影響不大;Y2在組織培養(yǎng)方面較Y1優(yōu)。6-BA0.6mg/L、IBA0.3 mg/L、KT1 mg/L及6-BA0.4 mg/L+IBA0.1 mg/L+KT1 mg/L是較適宜Y2增殖（繼代）培養(yǎng)的生長調(diào)節(jié)劑及組合，其增殖倍數(shù)最高可達(dá)4.60;6-BA0.2 mg/L; IBA0.3 mg/L、KT2 mg/L及IBA0.1 mg/L+K

4、T2 mg/L、
　　3.6-BA0.2 mg/L+IBA0.1 mg/L+KT3 mg/L是較適宜Y2增殖（繼代）培養(yǎng)的生長調(diào)節(jié)劑及組合，其增殖倍數(shù)最高為2.30;隨著遮光時(shí)間的延長，兩個(gè)無性系組培苗葉綠素a、葉綠素b及葉綠素總含量總體表現(xiàn)為逐漸降低;Y2、Y1總酚含量分別在遮光10d、遮光40d下達(dá)到最高;在相同的處理下，Y2的平均芽長及莖段增殖倍數(shù)均較Y1高。
　　4.1/4MS+ NAA0.4 mg/L+IBA0.9

5、 mg/L和IBA0.5 mg/L+ABT0.5mg/L+6-BA0.6 mg/L是紅心杉組培苗較適宜的瓶內(nèi)生根培養(yǎng)基配方，ABT1＃對(duì)紅心杉組培苗瓶內(nèi)生根及其葉綠素的積累有一定的促進(jìn)作用，且在0～1.0mg/L范圍內(nèi)，其濃度越高，其作用越明顯。1/4MS+ NAA0.4 mg/L+IBA0.9mg/L處理下，紅心杉生根率及葉綠素總含量最高，分別為78％、1.23 mg/g;當(dāng)IBA濃度低于6-BA濃度，并適當(dāng)添加ABT，有利于紅心杉組

6、培苗瓶內(nèi)生根。
　　5.紅心杉瓶內(nèi)生根移栽苗移栽時(shí)基質(zhì)中含有黃心土較利于其生長。以黃心土為基質(zhì)，紅心杉瓶內(nèi)生根移栽苗的保存率、苗高生長率及葉綠素總含量分別達(dá)94％、10.33％、1.48，以黃心土∶椰糠∶珍珠巖=7∶2∶1為基質(zhì)，其保存率及葉綠素總含量略低于黃心土，且顯著高于較椰糠∶泥炭土=9∶1。
　　6.IBA50mg/L+NAA25mg/L的不同浸泡時(shí)間處理下，浸泡時(shí)間5min較有利于紅心杉微扦插苗生根，其生根率為73