健康婦女及細(xì)菌性陰道病患者陰道菌群分析.pdf

1、細(xì)菌性陰道病(bacterial vaginosis，BV)是女性生殖道感染的最常見疾病，可引起嚴(yán)重的并發(fā)癥，包括盆腔炎、絨毛膜羊膜炎、早產(chǎn)、低出生體重兒，也使患者增加了感染HIV病毒的風(fēng)險(xiǎn)。復(fù)雜的陰道菌群變化在細(xì)菌性陰道病的發(fā)病中起著重要的作用。 本工作應(yīng)用構(gòu)建16s rRNA基因克隆文庫(kù)的非培養(yǎng)方法對(duì)健康婦女及BV患者的陰道菌群進(jìn)行分析。主要方法與結(jié)果如下： 1、根據(jù)Amsel臨床標(biāo)準(zhǔn)及Nugent評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)確診健康婦

2、女及BV患者各3例。提取其陰道分泌物中細(xì)菌的總DNA，構(gòu)建16s rRNA基因克隆文庫(kù)。運(yùn)用ARDRA分析275個(gè)陽性克隆子，選擇不同帶型的代表克隆子20個(gè)進(jìn)行測(cè)序，得到了20條有序列差異的16s rRNA基因，將這20條序列通過GenBank數(shù)據(jù)庫(kù)中的BLAST程序進(jìn)行序列相似性比較分析，產(chǎn)生了20個(gè)種。研究發(fā)現(xiàn)健康婦女樣本的基因文庫(kù)中分別以L． crispatus和L． iners克隆子占較大比例，另外存在少量的L． vaginal

3、is和L．jensenii克隆子。BV患者樣本的基因文庫(kù)中菌種明顯增多，但均以Gardnerella vaginalis和Atopobium vaginae的克隆子占較大比例。 2、應(yīng)用Atopobium vaginae16s rRNA基因的特異引物(AV1F，AV3R)對(duì)健康婦女(12例)及BV患者(14例)共26例樣本的總DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增。14例BV患者的樣本中有11例(78.6％)產(chǎn)生了特異性擴(kuò)增條帶，而在12例健康婦

4、女的樣本中僅有1例(8.3％)出現(xiàn)。 結(jié)論： 1．本研究表明健康婦女陰道的菌種單一，以乳酸桿菌占優(yōu)勢(shì)，L．iners為優(yōu)勢(shì)菌種之一。 2．本研究發(fā)現(xiàn)BV患者陰道菌種復(fù)雜多樣，但均以Gardnerella vaginalis及Atopobium vaginae共同占優(yōu)勢(shì)。PCR分析證實(shí)Atopobium vaginae與BV的發(fā)生具有相關(guān)性。 3．基于16s rRNA基因序列的非培養(yǎng)方法對(duì)陰道菌群的分析具有