發(fā)酵法生產(chǎn)褐藻膠寡糖的工藝研究.pdf

1、利用Pseudoalteromonaselyakouii菌株發(fā)酵降解分子量10000Dn左右的褐藻膠制備褐藻膠寡糖。為了達(dá)到降低培養(yǎng)基成本和簡化分離工藝的目的，使用(NH4)2SO4為氮源的發(fā)酵培養(yǎng)基來代替使用蛋白胨為氮源的發(fā)酵培養(yǎng)基，為了促進(jìn)菌的生長和發(fā)酵產(chǎn)物褐藻膠寡糖的生成，在新發(fā)酵培養(yǎng)基中分別添加海帶浸液、葡萄糖、乳糖、幾種氨基酸和幾種代謝中間產(chǎn)物(丙酮酸、檸檬酸、延胡索酸、尿素)，考察這些成分對菌生長和發(fā)酵產(chǎn)物褐藻膠寡糖生成的影

2、響。研究發(fā)現(xiàn)在基本培養(yǎng)基中和添加0.1g/L的L-谷氨酰氨、0.1g/L尿素或0.1g/L檸檬酸時獲得了較高的產(chǎn)物濃度。 采用單因子和混合正交實驗對生產(chǎn)褐藻膠寡糖的培養(yǎng)基組成和發(fā)酵條件進(jìn)行了優(yōu)化研究，篩選得到最佳發(fā)酵培養(yǎng)基組分為：10g/L低粘度褐藻酸鈉(SA)，10g/L(NH4)2SO4，20g/LNaCl，1g/L檸檬酸，3g/LMgSO4，1g/LNa2HPO4。發(fā)酵條件為：起始pH值7.5，接種量2％，溫度24℃，搖床

3、轉(zhuǎn)速100r/min。在此優(yōu)化條件下，發(fā)酵20h，發(fā)酵液在235nm處的吸光值為0.917。 在10L發(fā)酵罐中，利用Pseudoalteromonaselyakouii菌株發(fā)酵降解分子量10000Dn左右的褐藻膠制備褐藻膠寡糖，自由發(fā)酵(發(fā)酵時不進(jìn)行pH的控制)時，產(chǎn)物吸光值可達(dá)0.916，為了進(jìn)一步提高發(fā)酵產(chǎn)物濃度，本文在發(fā)酵過程的不同時段對發(fā)酵液pH值進(jìn)行調(diào)控。調(diào)節(jié)策略為：在整個發(fā)酵過程中控制發(fā)酵液的pH值為7.4；以自由發(fā)

4、酵過程中pH值的變化為依據(jù)確定調(diào)控時段，分別在發(fā)酵0～36h，36～72h兩個時間段控制發(fā)酵液pH值為7.4；以自由發(fā)酵過程中的pH值變化率為依據(jù)，分別在發(fā)酵11～14h處和37～41h處控制發(fā)酵液的pH值為7.4。試驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在發(fā)酵36～72h控制pH值在7.4，有最高的產(chǎn)物吸光值1.108，在發(fā)酵11～14h控制pH值時產(chǎn)物吸光值比較自由發(fā)酵時變化幅度最大，降低60％。 利用Pseudoalteromonaselyakou