發(fā)酵法生產番茄紅素的工藝研究.pdf

1、本文主要研究了三孢布拉氏霉菌發(fā)酵生產番茄紅素的工藝。針對菌體老化而導致發(fā)酵終期番茄紅素產量降低的問題，首次采用了孢子懸液直接接種的方式，并對菌種孢子的生長條件進行了優(yōu)化，發(fā)現菌體在28℃下生長3d，然后在18℃繼續(xù)生長2d，此時表面的孢子生長狀況最好，數量最多；并且充足的氧氣和良好的光照條件對生長有利。另外，提出了正負菌的孢子懸液按比例混合后直接進行發(fā)酵培養(yǎng)的一級培養(yǎng)工藝，該工藝穩(wěn)定、簡便，不僅提高了番茄紅素的產量，而且縮短了發(fā)酵培養(yǎng)時

2、間，并確定了該工藝的發(fā)酵周期為5d，阻斷劑的最優(yōu)添加時間為第60h。 在三孢酸及其結構類似物對番茄紅素發(fā)酵影響的研究中，分別討論了各種促進因子的最優(yōu)添加量。其中，每100mL培養(yǎng)基中，三孢酸的最優(yōu)添加量為2μg，可使其產量提高44.22％，對番茄紅素的刺激作用最顯著；相同條件下，脫落酸、α-紫羅酮、VitaminA和p-紫羅酮的最優(yōu)添加量依次為0.1mmol、30mg、0.1mmol和0.5mmol。另外，比較了Tris-H2S

3、O4溶液(pH=7.5)和95％的乙醇溶液對發(fā)酵的影響，最終選定Tris-H2SO4溶液作為三孢酸的溶劑。 本文采用高速逆流色譜和半制備高效液相色譜兩種方法，對三孢布拉式霉菌干菌體中的有效組分進行了分離分析。前者得到了一種未知物，純度達到97.1％，通過紅外、核磁等測定，初步推測其結構式為CH3(CH2)12CO-CH=CH2。半制備高效液相色譜法僅處于研究初期，實驗確定了流動相的最佳配比(乙腈：二氯甲烷=85：15，V/V)和