MLCK與糖尿病腦病相關(guān)性的研究.pdf

1、目的：本研究通過(guò)建立鏈脲佐菌素（STZ）誘導(dǎo)的1型糖尿?。═1DM）大鼠模型，用 Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)檢測(cè)其成模后不同時(shí)間段（成模后第六、第九及第十二周）的認(rèn)知功能，并用光學(xué)顯微鏡和透射電子顯微鏡觀察 T1DM大鼠海馬神經(jīng)元的形態(tài)學(xué)變化從而判斷 T1DM大鼠腦病形成的時(shí)間，同時(shí)在不同時(shí)間段檢測(cè) T1DM大鼠腦血管、海馬組織以及血清中肌球蛋白輕鏈激酶（MLCK）的水平以探討MLCK是否與糖尿病腦病發(fā)生發(fā)展有關(guān)，為進(jìn)一步研究MLCK在糖尿

2、病腦病發(fā)生發(fā)展中的作用機(jī)制打下基礎(chǔ)。
　　方法：
　　1.建立糖尿病腦病大鼠模型采用 SD大鼠腹腔注射高劑量（50mg/kg）STZ復(fù)制T1DM大鼠模型。成模后的大鼠在正常條件下飼養(yǎng)，并且分別在第6、9、12周通過(guò)Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)檢測(cè)大鼠的認(rèn)知功能，海馬組織切片HE染色后光學(xué)顯微鏡觀察海馬CA1區(qū)神經(jīng)元細(xì)胞數(shù)量及其形態(tài)，透射電鏡觀察海馬CA1區(qū)神經(jīng)元細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的變化，稱(chēng)量各組大鼠的大腦重量及其體重，并計(jì)算兩者之間的比

3、值，確定糖尿病腦病大鼠模型建立成功的時(shí)間。
　　2.分別在第6、9、12周運(yùn)用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法（ELISA法）檢測(cè)大鼠腦血管、海馬組織以及血清中MLCK的濃度。
　　結(jié)果：
　　1. T1DM大鼠從發(fā)病后第6周至第12周，其認(rèn)知功能障礙的程度隨著糖尿病病程的延長(zhǎng)呈進(jìn)行性加重，并用透射電鏡觀察到其海馬神經(jīng)元細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)發(fā)生了明顯改變，出現(xiàn)了細(xì)胞器數(shù)量減少、細(xì)胞核深染等一些細(xì)胞凋亡的特征，海馬組織切片HE染色后用光鏡在發(fā)

4、病后第12周時(shí)也可觀察到其海馬神經(jīng)元數(shù)量明顯減少及形態(tài)異常。此外，與同時(shí)間段的對(duì)照組大鼠比較，T1DM組大鼠的大腦重量及其體重明顯減輕；
　　2. T1DM腦病大鼠的腦血管、海馬組織以及血清中的MLCK濃度隨著其腦病病程的延長(zhǎng)均呈現(xiàn)逐漸升高的趨勢(shì)，并具有顯著性差異。
　　結(jié)論：
　　1.本研究通過(guò)使用STZ誘導(dǎo)SD大鼠形成T1DM，經(jīng)動(dòng)態(tài)觀察其行為學(xué)改變以及其大腦海馬神經(jīng)元細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化來(lái)確定糖尿病大鼠腦病形成的方法是