高壓氧與高濃度氧對(duì)新生小鼠視網(wǎng)膜和肺損傷作用的區(qū)別.pdf

1、反復(fù)使用高濃度氧（high-concentration oxygen，HO）治療可引起早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜?。╮etinopathy of prematurity，ROP）和支氣管肺發(fā)育不良（bronchopulmonary dysplasia，BPD）。HO的致ROP和BPD作用可能與血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）有關(guān)。國(guó)外有人報(bào)道，使用VEGF受體阻斷劑后可抑制HO引起的眼損傷，提示VEGF在HO致?lián)p傷過程中的重要性，國(guó)內(nèi)尚無類似報(bào)道。已有研

2、究表明，高壓氧（hyperbaric oxygen，HBO）與高濃度氧不同，在常規(guī)治療條件下的HBO不會(huì)引起ROP和BPD；但目前尚無資料證明HBO是否會(huì)影響VEGF的表達(dá)。本實(shí)驗(yàn)旨在探討HO和HBO對(duì)新生小鼠視網(wǎng)膜和肺組織的損傷和VEGF表達(dá)的區(qū)別，以及VEGF被SU-5416阻斷后對(duì)HO毒性作用的影響。 目的：觀察HO和HBO對(duì)新生小鼠視網(wǎng)膜和肺組織的毒性作用及VEGF表達(dá)的變化；觀察VEGF被SU-5416阻斷后對(duì)HO致新

3、生小鼠視網(wǎng)膜和肺組織損傷的影響。 方法：1.動(dòng)物分組及處理：7日齡昆明小鼠（性別不拘）隨機(jī)分為4組：正常對(duì)照組（CON組），高壓氧組（HBO組），高濃度氧組（HO組），VEGF受體阻斷劑（SU-5416）干預(yù)十高濃度氧組（SU組）。HBO組給予HBO（3.0 ATA）處理，每日1次，連續(xù)5d后在常壓空氣下飼養(yǎng)；HO組給予HO處理（氧濃度為88％～92％），連續(xù)5d后在常壓空氣下飼養(yǎng)；SU組根據(jù)本次LD50試驗(yàn)的結(jié)果，確定SU-5

4、416的劑量為7.5μg/g，其溶劑二甲基亞砜（diformazan，DMSO）的劑量為2.5μl/g，于7日齡時(shí)單次腹腔注射后給予HO處理（氧濃度同HO組），連續(xù)5d HO處理后在常壓空氣下飼養(yǎng)；正常對(duì)照組不予任何干預(yù)；4組動(dòng)物均于鼠齡17d處死。墨汁染色視網(wǎng)膜鋪片觀察視網(wǎng)膜新生血管；眼球及肺組織病理學(xué)檢查：4組小鼠眼球及肺組織做HE染色，光鏡下觀察眼球視網(wǎng)膜增生血管芽數(shù)，肺組織形態(tài)學(xué)變化；血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）的免疫組化：觀察

5、視網(wǎng)膜及肺組織VEGF的表達(dá)情況并進(jìn)行半定量分析。 結(jié)果：視網(wǎng)膜血管新生血管芽細(xì)胞核計(jì)數(shù)顯示與CON組相比，HO組血管芽細(xì)胞核增生明顯，P<0.001；HBO組則無明顯增生；SU組也有增生，但較HO組為少，P<0.001。視網(wǎng)膜鋪片顯示，與CON組比較，HO組血管增生明顯；HBO組和SU組雖然也有輕度增生，但較HO組為輕。視網(wǎng)膜VEGF免疫組化可見CON組有微弱表達(dá)，HO組較CON組表達(dá)明顯增高，P<0.001；HBO組VEGF

6、表達(dá)較CON組增高，但不如HO組表達(dá)明顯；SU組VEGF表達(dá)微弱，與CON組無明顯差別。肺組織HE染色光學(xué)顯微鏡下觀察其空泡面積比顯示，CON組、HBO組、SU組均以肺泡的空泡占主要面積，肺間隔細(xì)胞較少，而HO組肺間隔增厚明顯，空泡面積明顯減??；HBO組肺泡面積與CON組差別不大，肺間隔增厚程度較HO組明顯減??；SU組肺泡面積較CON組明顯減小，增生的肺間隔厚度較HO組也明顯減小，P<0.001。肺組織VEGF免疫組化可見CON組VEG

7、F表達(dá)明顯，HO組較CON組表達(dá)明顯降低，P<0.001；HBO組VEGF表達(dá)與CON組無明顯差別，較HO組表達(dá)明顯；SU組VEGF表達(dá)較CON組減弱，但較HO組的表達(dá)為高，P<0.001。 結(jié)論：1）HO可導(dǎo)致新生小鼠視網(wǎng)膜血管增生和肺組織損傷。2）HO對(duì)新生小鼠視網(wǎng)膜和肺組織中VEGF表達(dá)的影響不同，前者表達(dá)增高，后者降低。3）HO導(dǎo)致新生小鼠視網(wǎng)膜和肺損傷與VEGF表達(dá)的改變有關(guān)。4）HBO不會(huì)導(dǎo)致新生小鼠視網(wǎng)膜血管增生和