逆轉(zhuǎn)座子atr1脅迫誘導(dǎo)表達(dá)活性研究及植原體對(duì)繁昌長(zhǎng)棗的影響.pdf

1、前期研究表明逆轉(zhuǎn)座子atr1參與了蘋果短枝變異，為研究atr1活性表達(dá)條件，本試驗(yàn)借助已獲得的atr1-LTR，利用熒光定量PCR技術(shù)，研究了逆轉(zhuǎn)座子atr1在不同脅迫處理?xiàng)l件下的表達(dá)活性，為今后利用逆轉(zhuǎn)座子atr1創(chuàng)造突變提供借鑒。
　　以蘋果幼樹為試材，分別進(jìn)行SA、2，4-D、ABA及傷害脅迫處理，清水處理為對(duì)照，RNA提取后經(jīng)DNase消化反轉(zhuǎn)錄成cDNA，依據(jù)atr1-LTR設(shè)計(jì)引物進(jìn)行RT-PCR，檢測(cè)結(jié)果表明逆轉(zhuǎn)座子

2、atr1在對(duì)照及各處理樣品中均有不同程度表達(dá);以GAPDH為內(nèi)參，熒光定量分析表明ABA、傷害和2，4-D能顯著提高atr1表達(dá)活性;2,4-D處理后不同時(shí)間點(diǎn)取樣分析結(jié)果表明，atr1轉(zhuǎn)錄活性呈現(xiàn)先高后低的趨勢(shì)，處理后9h表達(dá)活性達(dá)到高峰。
　　安徽地方棗種質(zhì)資源豐富，近年來(lái)，由植原體引起棗瘋病已成為威脅地方棗產(chǎn)業(yè)發(fā)展的重要障礙。本研究分析了安徽地方棗種質(zhì)棗瘋病16S rDNA序列特性;比較了健康植株及植原體脅迫條件下棗新梢中細(xì)

3、胞分裂素和生長(zhǎng)素的含量;克隆了棗ipt基因部分片段。
　　1.研究了安徽地方棗種質(zhì)棗瘋病16S rDNA序列特性。以表現(xiàn)棗瘋病植原體癥狀的繁昌長(zhǎng)棗葉片DNA為模板，克隆了棗瘋病植原體16S rDNA序列，獲得—1248bp的片段，命名為JWB-FJP1。同源性分析結(jié)果表明，JWB-FJP1屬于16Sr V-B組，與重慶地方棗棗瘋病植原體JWB-Xch(JQ675716)同源性最高，達(dá)到99.92％;與河北棗棗瘋病植原體JWB-He

4、bei(GU184186)同源性最低，為67.06％。說(shuō)明不同寄主植原體存在不同的生物學(xué)類型。本研究為安徽地方棗種質(zhì)棗瘋病病原分類及其快速鑒定提供了理論依據(jù)[73]。
　　2.健康植株及植原體感染病株新梢中細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素含量的測(cè)定。利用ELISA法分別檢測(cè)了5月和7月健康植株與植原體感染病株新梢中細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素，結(jié)果表明:植原體感染的病株新梢中細(xì)胞分裂素含量高于健康植株。
　　3.棗異戊烯基轉(zhuǎn)移酶基因部分片段的克隆。