人造血管移植物和多針頭手術(shù)縫線的基礎(chǔ)研究.pdf

1、自體血管移植物不能滿足臨床CABG的需要,同種異體和異種血管移植物因存在免疫排斥反應(yīng)而不能滿足臨床的需要.人造血管的研究有多年歷史,盡管至今尚不能為CABG提供理想的移植物,但人造血管的種種優(yōu)點(diǎn)使它有可能成為最有前途的移植物.本項(xiàng)研究計(jì)劃擬以tPA基因?qū)ψ泽wEC進(jìn)行改造,然后將該細(xì)胞種植于異種血管內(nèi)壁,從而制成具有良好抗凝血活性的復(fù)合人造血管.本文擬先獲取自體的大隱靜脈EC,進(jìn)行擴(kuò)增培養(yǎng)后,摸索出理想的培養(yǎng)方法,然后對(duì)其進(jìn)行tPA基因轉(zhuǎn)

2、染,尋找出快捷、實(shí)用的人造血管種子細(xì)胞獲取途徑,為下一步其它部分的研究做好準(zhǔn)備.3.結(jié)論3.1通過(guò)各種物理或者化學(xué)的手段不能使人造血管獲得長(zhǎng)期的通暢,目前最為理想的方法是以EC對(duì)人造管道進(jìn)行種植.而對(duì)于CABG手術(shù)病人,只有自體EC才能滿足手術(shù)的需要,其它來(lái)源的內(nèi)皮細(xì)胞由于不可避免地出現(xiàn)排斥反應(yīng)而都不能滿足CABG人造管道的需要.3.2自體EC不能隨意取自機(jī)體的微血管或者大血管,較為合理的來(lái)源應(yīng)該是CABG自身的是大隱靜脈.為獲得足以有

3、效培養(yǎng)的EC來(lái)源,大隱靜脈切取的最短長(zhǎng)度應(yīng)不少于8cm.3.3外界培養(yǎng)條件對(duì)EC的結(jié)構(gòu)和功能有明顯的影響,而這些結(jié)構(gòu)和功能的變化可能影響EC的抗凝血活性,因此,為了獲得滿意的EC,培養(yǎng)的時(shí)間應(yīng)該盡量縮短、傳代的次數(shù)應(yīng)該盡量減少、細(xì)胞培養(yǎng)的環(huán)境條件應(yīng)該盡量接近生理狀況下的條件.本實(shí)驗(yàn)中使用的方法是一種可靠的獲取EC的方法.3.4為了增加人造血管的抗凝血活性,有必要對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行基因工程改造.而這種改造的前提是獲得一個(gè)理想的在載體.本研究利

4、用一種特殊的真核細(xì)胞表達(dá)載體pEGFP-C2構(gòu)建了tPA/pEGFP-C2.3.5以tPA/pEGFP-C2載體轉(zhuǎn)染培養(yǎng)的自體大隱靜脈EC,獲得了轉(zhuǎn)染tPA基因的EC,經(jīng)檢測(cè),這種細(xì)胞包含了tPA基因,并且能夠在體外表達(dá)tPA.3.6自體大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞轉(zhuǎn)染tPA基因的成功,為現(xiàn)有方法進(jìn)行基因工程人造血管的制作提供了理想的種子細(xì)胞.實(shí)驗(yàn)表明,該方法是一個(gè)簡(jiǎn)單快捷的轉(zhuǎn)染內(nèi)皮細(xì)胞的方法,具有很強(qiáng)的實(shí)用性,對(duì)人造血管制作的整個(gè)過(guò)程都有非常重要

5、的意義.我們發(fā)明了一種多針頭心臟手術(shù)縫線(POS),這種縫線設(shè)計(jì)與傳統(tǒng)的手術(shù)縫線明顯不同.該縫線由多個(gè)相連的針和線組成,每個(gè)針和兩個(gè)相鄰的線連接,每縫合一針可以引過(guò)兩條線.為了證明POS在心臟手術(shù)中的實(shí)用性,我們對(duì)其基本特性以及在各種手術(shù)中使用的可能性進(jìn)行了研究.3.結(jié)論P(yáng)OS是一種特殊的手術(shù)縫線,該縫線每個(gè)縫針和兩條相鄰的線相連,每穿一針,可以引過(guò)兩條縫線.以這種縫線進(jìn)行縫合,可以明顯縮短手術(shù)時(shí)間,使某些心臟手術(shù)簡(jiǎn)化.在瓣膜置換、室間