轉(zhuǎn)脂氧合酶Lox1基因水稻抗瘟性分析.pdf

1、脂氧合酶(LOX)是脂氧合酶途徑中的關(guān)鍵酶之一，在植物的防衛(wèi)反應(yīng)過程中起重要作用。為了研究水稻脂氧合酶在水稻抗稻瘟病過程所起的作用，本實(shí)驗(yàn)室曾經(jīng)從與稻瘟菌非親和互作的水稻中克隆了一種脂氧合酶基因(Lox1)，構(gòu)建了其sense(1S)、antisense(1A)和hairpin(1H)結(jié)構(gòu)的雙元表達(dá)載體，并通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)法獲得了轉(zhuǎn)基因水稻。在此基礎(chǔ)上，本研究對(duì)上述轉(zhuǎn)Lox1基因水稻進(jìn)行了轉(zhuǎn)基因檢測(cè)和抗瘟性分析。　　潮霉素抗性分析表明，

2、轉(zhuǎn)基因的插入情況大多為單位點(diǎn)、單拷貝。分別對(duì)Lox1基因轉(zhuǎn)sense、antisense和hairpin結(jié)構(gòu)共135個(gè)株系的水稻T1、T2代植株進(jìn)行了抗瘟性分析。1S結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)基因水稻接種親和性稻瘟菌007小種，由感病性轉(zhuǎn)變?yōu)榭共⌒裕浩渲性?2個(gè)轉(zhuǎn)基因水稻株系中，有12個(gè)株系的T1、T2后代均發(fā)生了抗感病變化，另有1個(gè)只在T1后代發(fā)生了抗感病變化和28個(gè)株系只在T2后代發(fā)生了抗感病變化。1A和1H結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)基因水稻接種非親和性稻瘟菌131小種，

3、由抗病性轉(zhuǎn)變?yōu)楦胁⌒裕浩渲?A的30個(gè)轉(zhuǎn)基因水稻株系中，有14個(gè)株系的T1、T2后代抗感病發(fā)生了變化，另外有7個(gè)株系只在T1代發(fā)生了抗感病變化和1個(gè)株系只在T2代發(fā)生了抗感病變化；1H的43個(gè)轉(zhuǎn)基因水稻株系中，有6個(gè)株系的T1、T2后代發(fā)生了感病變化，另外有13個(gè)株系只在T1后代發(fā)生了抗感病變化和2個(gè)株系只在T2后代發(fā)生了抗感病變化。分別選取有抗感病變化的S結(jié)構(gòu)9個(gè)株系、A結(jié)構(gòu)5個(gè)株系和H結(jié)構(gòu)5個(gè)株系作Southern雜交分析，結(jié)果表明