二倍體馬鈴薯青枯病抗性的分離及分子標記鑒定.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、該試驗旨在利用具有青枯病抗性的原始栽培種S.phureja及野生種S.vernei所產生的二個相關的二倍體分離群體(CE,BC1)和(ED,F1),進行田間溫室青枯菌接種鑒定,分析二倍體馬鈴薯青枯病抗性的遺傳規(guī)律;并利用RAPD技術,結合群分法(Bulked Segregant Analysis, BSA)策略,篩選與青枯病抗性緊密連鎖的分子標記.主要實驗結果如下:1.通過青枯菌生理1號小種(生化小種3號)對兩群體單株進行田間溫室接種鑒

2、定,發(fā)現CE、ED兩群體青枯病抗性的分離比例,經卡方測驗均符合1:1,為分析標記的共分離奠定了基礎.2.利用RAPD技術,結合群分法,從160個隨機引物中篩選得到兩個與青枯病抗性連鎖的標記OPA07<,446>和OPA12<,980>,對于ED群體,標記OPA07<,446>與青枯病抗性位點的圖譜距離為14.7cM,OPA12<,980>與青枯病抗性位點的圖譜距離為24.7cM,并且位于同一連鎖群,為一對側翼標記,兩個標記之間連鎖距離為

3、39.4cM.對于CE群體,標記OPA07<,446>與青枯病抗性位點的圖譜距離為23.9cM,OPA12<,980>與青枯病抗性位點的圖譜距離為31.4cM,但在CE群體中,沒有檢測到兩標記間存在連鎖.3.對單標記與雙標記選擇準確性的比較發(fā)現,在ED群體中,標記OPA07<,446>選擇的準確率為85.7﹪,標記OPA12<,980>選擇的準確率為75.7﹪,兩個標記OPA07<,446>和OPA12<,980>一起選擇的準確率為95

4、.7﹪;在CE群體中,標記OPA07<,446>選擇的準確率為77.8﹪,標記OPA12<,980>選擇的準確率為72.2﹪,兩個標記OPA07<,446>和OPA12<,980>一起選擇的準確率為95.0﹪.據此提出了雙側翼標記共選擇的分子標記輔助選擇策略.4.通過對特異標記片段的回收、克隆及測序,設計SCAR引物,成功將RAPD標記OPA07<,446>和OPA12<,980>轉化為SCAR標記SCA07<,446>和SCA12<,

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