中草藥對犬生殖系統影響及促進犬發(fā)情機理研究.pdf

1、本實驗綜合醫(yī)學治療婦女不孕癥的經驗和獸醫(yī)臨床上誘導豬、牛、羊等發(fā)情的實驗報道，篩選出12種中草藥。按照祖國醫(yī)藥學傳統理論，考查藥物間的合理配伍及藥物與動物生殖內分泌之間的關系，用現代科學手段考查中草藥各成分在處方中的作用，合理組方，使藥物間產生協同作用。組成八個方劑應用于小白鼠，觀測了小白鼠子宮和卵巢總重量、子宮角中段外徑厚度、子宮角長度及卵巢、子宮的組織學變化，根據不同方劑對小白鼠上述檢測指標的影響，篩選出對小白鼠生殖系統有較大促進作

2、用的中草藥組方。將中藥組方應用于處于間情期的健康京巴母犬。每只母犬每天經口灌服復方中草藥煎劑4ml，連用20d。每天觀察試驗犬的行為變化、外觀變化、陰道黏液變化。用藥期間定期靜脈采血，分離血清，測定雌二醇、孕酮和白細胞介素-1、白細胞介素-6的變化，在用藥后的第14d、16d、18d、20d、25d剖殺試驗犬，取出其卵巢、子宮和陰道，制成切片，于光學顯微鏡下觀察卵巢、子宮內膜和陰道等的組織學變化規(guī)律。將中藥組方制成注射液，用于子宮灌注。

3、同時對注射液進行了穩(wěn)定性、安全性、質量標準和藥代動力學實驗，最后進行了藥物誘導犬發(fā)情效果的試驗研究。試驗結果如下：　　1.不同中藥處理后小白鼠的子宮和卵巢總重量、子宮角中段外徑厚度及大、中型卵泡比例和最大卵泡直徑較對照組均發(fā)生了顯著變化，其中，中藥組方Ⅱ、中藥組方Ⅳ和中藥組方Ⅴ的子宮卵巢重與體重的比值、子宮角中段外徑厚度較對照組顯著增大(P＜0.01)，說明中藥組方Ⅱ、中藥組方Ⅳ、特別是中藥組方Ⅴ對小白鼠的生殖系統發(fā)育有顯著的促進作用

4、?！　?.根據篩選結果，確定中藥組方Ⅴ為最佳組方。并用其誘導母犬發(fā)情。應用該組方誘導母犬發(fā)情開始時，受試犬血漿中E2的平均含量為10pg/ml左右，用藥5d后開始增加，第9d時迅速增加，至第15d(即發(fā)情前期結束前1～2d)時達到峰值58.33pg/ml，隨后，E2濃度迅速下降。于25d降到18.17pg/ml。P4濃度在用藥時及整個發(fā)情前期均很低，用藥5d時濃度為0.12ng/ml，到17d濃度達到0.32ng/ml并持續(xù)升高，到2

5、1d(排卵前后)時其濃度可升高到2.21ng/ml左右，以后逐漸升高，到25d達到6.42ng/ml?！　?.應用中藥組方Ⅴ藥物5d后，犬血漿中IL-1β濃度達到0.578ng/ml，并持續(xù)升高，在17d達到峰值0.830ng/ml，到21d排卵前后降到0.703ng/ml，25d降到0.608ng/ml。而IL-6濃度在第5d為0.163ng/ml，以后持續(xù)升高，到17d達到0.312ng/ml，到21d排卵前后達到峰值0.348n

6、g/ml，以后開始下降，到25d降為0.285ng/ml?！　?.應用中藥組方Ⅴ藥物7d后，50％試驗犬從陰道排出暗紅色血樣分泌物，陰道涂片中出現紅細胞；用藥后14d時，陰道涂片中出現角化細胞。中藥應用后犬的陰道壁厚度，卵巢重量都較對照組有極顯著(P＜0.01)的變化；子宮角圓周長，子宮體圓周長變化顯著(P＜0.05)；子宮切片顯示，子宮內膜水腫，表層的子宮腺體大小不等，形狀不規(guī)則，有的腺體內有紅細胞。卵巢切片中可見卵泡開始發(fā)育，出現

7、卵泡腔。用藥后17d，陰道涂片中角化細胞數量增多，細胞核模糊不清；子宮切片顯示，子宮內膜進一步增厚，腺體增生；卵巢切片中出現有腔卵泡，卵泡數量增多，形成顆粒層和卵丘。用藥后20d時，陰道涂片中細胞完全角化，細胞核不明顯；子宮切片顯示，子宮內膜有明顯凹凸，內膜厚度增加，表層腺體的切面小呈環(huán)狀，深部腺體稍大，排列緊密，表明腺體細胞處在機能活躍狀態(tài)；卵巢切片中可見即將成熟排卵的卵泡，卵巢體積急劇增大，卵泡腔增大，直徑可達3～4mm，卵泡腔內充

8、滿卵泡液，卵細胞與卵丘分離，顆粒層變薄，卵泡膜清楚可見。卵泡已經移行到卵巢表面，即將排卵?！　?.中藥組方Ⅴ注射液對光和熱穩(wěn)定，對豚鼠皮膚無過敏反應，對家兔眼具有溫和的刺激作用，急性毒性試驗中口服安全可靠，腹腔注射測得LD50=1920.84+133.66mg/kg，最大耐受量110倍。　　6.中藥組方Ⅴ注射液質量標準實驗根據三種不同展開劑所得的三種層析譜的結果分析，注射液中含有菟絲子、紅花、益母草、淫羊藿、女貞子、香附等成分。三種

9、層析譜可作為該注射液的層析檢識。從紫外吸收曲線來看，該注射液在波長245～260nm處有一個黃酮類化合物形成的吸收峰，在波長265～280nm處有一個生物堿類化合物形成的吸收峰，此波長吸收度曲線也是該注射液的特征性吸收曲線?！　?.中藥組方Ⅴ的藥代動力學實驗結果表明，中藥組方Ⅴ的ka值為3.6769/h或2.6809/h，Tp值為1.1732h或1.239h，Cmax值為3324.277μg/ml或254.277μg/ml，kel為0