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文檔簡(jiǎn)介
1、本實(shí)驗(yàn)綜合醫(yī)學(xué)治療婦女不孕癥的經(jīng)驗(yàn)和獸醫(yī)臨床上誘導(dǎo)豬、牛、羊等發(fā)情的實(shí)驗(yàn)報(bào)道,篩選出12種中草藥。按照祖國(guó)醫(yī)藥學(xué)傳統(tǒng)理論,考查藥物間的合理配伍及藥物與動(dòng)物生殖內(nèi)分泌之間的關(guān)系,用現(xiàn)代科學(xué)手段考查中草藥各成分在處方中的作用,合理組方,使藥物間產(chǎn)生協(xié)同作用。組成八個(gè)方劑應(yīng)用于小白鼠,觀測(cè)了小白鼠子宮和卵巢總重量、子宮角中段外徑厚度、子宮角長(zhǎng)度及卵巢、子宮的組織學(xué)變化,根據(jù)不同方劑對(duì)小白鼠上述檢測(cè)指標(biāo)的影響,篩選出對(duì)小白鼠生殖系統(tǒng)有較大促進(jìn)作
2、用的中草藥組方。將中藥組方應(yīng)用于處于間情期的健康京巴母犬。每只母犬每天經(jīng)口灌服復(fù)方中草藥煎劑4ml,連用20d。每天觀察試驗(yàn)犬的行為變化、外觀變化、陰道黏液變化。用藥期間定期靜脈采血,分離血清,測(cè)定雌二醇、孕酮和白細(xì)胞介素-1、白細(xì)胞介素-6的變化,在用藥后的第14d、16d、18d、20d、25d剖殺試驗(yàn)犬,取出其卵巢、子宮和陰道,制成切片,于光學(xué)顯微鏡下觀察卵巢、子宮內(nèi)膜和陰道等的組織學(xué)變化規(guī)律。將中藥組方制成注射液,用于子宮灌注。
3、同時(shí)對(duì)注射液進(jìn)行了穩(wěn)定性、安全性、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和藥代動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn),最后進(jìn)行了藥物誘導(dǎo)犬發(fā)情效果的試驗(yàn)研究。試驗(yàn)結(jié)果如下: 1.不同中藥處理后小白鼠的子宮和卵巢總重量、子宮角中段外徑厚度及大、中型卵泡比例和最大卵泡直徑較對(duì)照組均發(fā)生了顯著變化,其中,中藥組方Ⅱ、中藥組方Ⅳ和中藥組方Ⅴ的子宮卵巢重與體重的比值、子宮角中段外徑厚度較對(duì)照組顯著增大(P<0.01),說(shuō)明中藥組方Ⅱ、中藥組方Ⅳ、特別是中藥組方Ⅴ對(duì)小白鼠的生殖系統(tǒng)發(fā)育有顯著的促進(jìn)作用
4、。 2.根據(jù)篩選結(jié)果,確定中藥組方Ⅴ為最佳組方。并用其誘導(dǎo)母犬發(fā)情。應(yīng)用該組方誘導(dǎo)母犬發(fā)情開始時(shí),受試犬血漿中E2的平均含量為10pg/ml左右,用藥5d后開始增加,第9d時(shí)迅速增加,至第15d(即發(fā)情前期結(jié)束前1~2d)時(shí)達(dá)到峰值58.33pg/ml,隨后,E2濃度迅速下降。于25d降到18.17pg/ml。P4濃度在用藥時(shí)及整個(gè)發(fā)情前期均很低,用藥5d時(shí)濃度為0.12ng/ml,到17d濃度達(dá)到0.32ng/ml并持續(xù)升高,到2
5、1d(排卵前后)時(shí)其濃度可升高到2.21ng/ml左右,以后逐漸升高,到25d達(dá)到6.42ng/ml?! ?.應(yīng)用中藥組方Ⅴ藥物5d后,犬血漿中IL-1β濃度達(dá)到0.578ng/ml,并持續(xù)升高,在17d達(dá)到峰值0.830ng/ml,到21d排卵前后降到0.703ng/ml,25d降到0.608ng/ml。而IL-6濃度在第5d為0.163ng/ml,以后持續(xù)升高,到17d達(dá)到0.312ng/ml,到21d排卵前后達(dá)到峰值0.348n
6、g/ml,以后開始下降,到25d降為0.285ng/ml。 4.應(yīng)用中藥組方Ⅴ藥物7d后,50%試驗(yàn)犬從陰道排出暗紅色血樣分泌物,陰道涂片中出現(xiàn)紅細(xì)胞;用藥后14d時(shí),陰道涂片中出現(xiàn)角化細(xì)胞。中藥應(yīng)用后犬的陰道壁厚度,卵巢重量都較對(duì)照組有極顯著(P<0.01)的變化;子宮角圓周長(zhǎng),子宮體圓周長(zhǎng)變化顯著(P<0.05);子宮切片顯示,子宮內(nèi)膜水腫,表層的子宮腺體大小不等,形狀不規(guī)則,有的腺體內(nèi)有紅細(xì)胞。卵巢切片中可見卵泡開始發(fā)育,出現(xiàn)
7、卵泡腔。用藥后17d,陰道涂片中角化細(xì)胞數(shù)量增多,細(xì)胞核模糊不清;子宮切片顯示,子宮內(nèi)膜進(jìn)一步增厚,腺體增生;卵巢切片中出現(xiàn)有腔卵泡,卵泡數(shù)量增多,形成顆粒層和卵丘。用藥后20d時(shí),陰道涂片中細(xì)胞完全角化,細(xì)胞核不明顯;子宮切片顯示,子宮內(nèi)膜有明顯凹凸,內(nèi)膜厚度增加,表層腺體的切面小呈環(huán)狀,深部腺體稍大,排列緊密,表明腺體細(xì)胞處在機(jī)能活躍狀態(tài);卵巢切片中可見即將成熟排卵的卵泡,卵巢體積急劇增大,卵泡腔增大,直徑可達(dá)3~4mm,卵泡腔內(nèi)充
8、滿卵泡液,卵細(xì)胞與卵丘分離,顆粒層變薄,卵泡膜清楚可見。卵泡已經(jīng)移行到卵巢表面,即將排卵?! ?.中藥組方Ⅴ注射液對(duì)光和熱穩(wěn)定,對(duì)豚鼠皮膚無(wú)過(guò)敏反應(yīng),對(duì)家兔眼具有溫和的刺激作用,急性毒性試驗(yàn)中口服安全可靠,腹腔注射測(cè)得LD50=1920.84+133.66mg/kg,最大耐受量110倍?! ?.中藥組方Ⅴ注射液質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)根據(jù)三種不同展開劑所得的三種層析譜的結(jié)果分析,注射液中含有菟絲子、紅花、益母草、淫羊藿、女貞子、香附等成分。三種
9、層析譜可作為該注射液的層析檢識(shí)。從紫外吸收曲線來(lái)看,該注射液在波長(zhǎng)245~260nm處有一個(gè)黃酮類化合物形成的吸收峰,在波長(zhǎng)265~280nm處有一個(gè)生物堿類化合物形成的吸收峰,此波長(zhǎng)吸收度曲線也是該注射液的特征性吸收曲線?! ?.中藥組方Ⅴ的藥代動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,中藥組方Ⅴ的ka值為3.6769/h或2.6809/h,Tp值為1.1732h或1.239h,Cmax值為3324.277μg/ml或254.277μg/ml,kel為0
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