抗犬流感病毒單味中草藥體外篩選.pdf

1、犬流感是由犬流感病毒(Canine influenza virus，CIV)引起的傳染性疾病，主要癥狀有體溫升高、咳嗽、流鼻液、呼吸困難等。犬流感傳播廣泛，嚴重的可引起犬死亡。
　　 另外，抗病毒的化學合成藥物主要有病毒唑、病毒靈等，種類比較少，治療效果較差。外源性的細胞因子能抑制病毒復制，提高提高機體細胞免疫功能，但其針對性較差，長期使用會造成自身免疫力的下降。
　　 目前，世界上許多國家都已經(jīng)加大了對中藥的研究。中藥

2、治療流感具有一定的效果，毒副作用小，在治療病毒感染性疾病方面顯示出了獨特的優(yōu)勢，但針對流感病毒的中藥尚缺乏針對性篩選。
　　 本研究主要是以野菊花、連翹、板藍根、黃連、細辛、穿心蓮、地丁、苦參、荊芥、魚腥草、白頭翁、黃柏、茵陳、金銀花、蒲公英、大青葉、貫眾、黃芩、柴胡、藿香等20種單味中藥的提取液為試驗藥物，并以利巴韋林為陽性對照藥物，進行體外抗病毒實驗。測試上述藥物對犬流感病毒的抗病毒效果，以篩選出較為有效的抗犬流感病毒中藥，

3、以期用于臨床治療。各種中草藥采用傳統(tǒng)的的水煮浸法分別提取、濃縮，制成0.5g/ml的藥液。測定藥物對MDCK細胞的毒性作用，并確定藥物的最大安全濃度，以安全濃度進行抗病毒試驗。以MTT法（四甲基偶氮唑鹽微量酶反應(yīng)比色法）檢測細胞活性，從20種中藥中篩選出幾種效果較好的抗犬流感病毒的中藥。采用分組處理法（Ⅰ組:先加藥物后加病毒;Ⅱ組:先加病毒后加藥物;Ⅲ、Ⅳ組，藥物與病毒同時加入），對已篩選出的藥物進行抗病毒機制的初步探索（推斷中藥作用于

4、病毒感染的哪一個環(huán)節(jié)）。為犬流感的臨床治療提供依據(jù)，同時也為人類及其他動物的抗流感藥物的篩選提供借鑒。
　　 毒性試驗結(jié)果:穿心蓮、野菊花等20種中草藥提取物的最大無毒濃度在0.12～32.25mg/ml之間，利巴韋林的最大無毒濃度為5ug/ml。
　　 初篩實驗結(jié)果:穿心蓮、苦參、黃連、蒲公英、野菊花具有極顯著的抗病毒效果，穿心蓮、苦參、黃連、蒲公英抗流感病毒的效果極顯著優(yōu)于利巴韋林(P＜0.01)，野菊花抗病毒的效果

5、顯著優(yōu)于利巴韋林(P＜0.05)，表明穿心蓮、苦參、黃連、蒲公英、野菊花能明顯的抑制犬流感病毒的感染過程，其效果優(yōu)于利巴韋林。
　　 分組實驗的結(jié)果:Ⅰ組中，苦參能夠極顯著的抑制病毒的吸附與進入細胞的過程，極顯著地優(yōu)于利巴韋林(P＜0.01)。在Ⅱ組、Ⅲ組、Ⅳ組中，14種藥物對病毒的生物合成與釋放具有顯著的抑制作用，同時具有直接殺滅病毒的作用，但其效果極顯著的低于利巴韋林(P＜0.01)。說明14種中草藥能夠抑制犬流感病毒的吸附