口蹄疫的RT-PCR檢測及免疫抗體監(jiān)測.pdf

1、口蹄疫(Foot-and-mouthdisease，F(xiàn)MD)是由口蹄疫病毒(Foot-and-mouthdiseasevirus，F(xiàn)MDV)引起的偶蹄動(dòng)物的一種急性高度接觸性傳染性疫病，被國際獸疫局列為A類動(dòng)物傳染病之首。通過交叉保護(hù)試驗(yàn)和血清學(xué)試驗(yàn)確定FMDV有7個(gè)血清型，即O、A、C、AsiaⅠ和SAT1、SAT2、SAT3，及65個(gè)以上的血清亞型，血清型之間無交叉和交叉免疫現(xiàn)象。O、A、C型FMDV的毒力和抗原性均易發(fā)生變異，幾乎

2、遍布亞、非、拉、歐各洲；SAT1、SAT2、SAT3主要分布在非洲，AsiaⅠ型主要分布在亞洲，及中國的云南、新疆等。由于口蹄疫(FMD)是世界范圍內(nèi)危害最嚴(yán)重的烈性傳染病，并且口蹄疫血清型多，變異株多，分部廣，傳播速度快，要求防制體系具有快速正確的反應(yīng)能力，疫情監(jiān)測系統(tǒng)是決定反應(yīng)快慢及正確與否的關(guān)鍵，而診斷方法是監(jiān)測系統(tǒng)的技術(shù)依托，準(zhǔn)確可靠的診斷結(jié)果是制定正確防制措施的依據(jù)。 本研究對(duì)昆明地區(qū)O型FMDV流行狀況進(jìn)行了調(diào)查，結(jié)

3、合昆明地區(qū)口蹄疫診斷檢測及防治過程中存在的主要問題，參考已發(fā)表的口蹄疫有關(guān)序列，有針對(duì)性地設(shè)計(jì)了口蹄疫群特異性引物和型特異性引物，并與OIE指定的口蹄疫AC-ELISA檢測方法進(jìn)行了比較。對(duì)標(biāo)準(zhǔn)毒株、野毒株及臨床中疑似口蹄疫病料進(jìn)行RT-PCR檢測，結(jié)果證明：群特異性引物P2B1/P2B2對(duì)O型和Asia-Ⅰ型標(biāo)準(zhǔn)毒株和野毒株都能擴(kuò)增出特異的目的基因片段；型特異性引物P1D1/P2B1、P1D2/P2B1可對(duì)這兩型的病毒進(jìn)行快速分型，結(jié)

4、果與AC-ELISA檢測結(jié)果相符，以此構(gòu)建的口蹄疫RT-PCR技術(shù)是口蹄疫的一種快速、準(zhǔn)確、靈敏、特異地檢測方法。 根據(jù)診斷結(jié)果，對(duì)口蹄疫疫區(qū)的動(dòng)物用不同廠家疫苗進(jìn)行免疫，并用正向間接血凝進(jìn)行抗體監(jiān)測，監(jiān)測結(jié)果表明：各個(gè)廠家不同批次的疫苗免疫后，抗體水平差異不顯著；而在不同動(dòng)物之間的抗體水平比較發(fā)現(xiàn)，牛高于羊、羊高于豬。免疫后60天后，抗體水平開始下降，說明目前使用的口蹄免疫苗免疫保護(hù)期短，二次免疫的抗體水平好于一次免疫的，濃縮