Eu標(biāo)記RT-PCR檢測(cè)丙型肝炎病毒RNA.pdf

1、目的：采用一種新型銪螯合物BHHCT,作為高靈敏度熒光標(biāo)記物,建立一種檢測(cè)丙型肝炎病毒（HCV）RNA的方法.并將該方法與酶標(biāo)法在反應(yīng)懷、靈敏度、特異性、重復(fù)性等方面進(jìn)行比較.結(jié)論：1.該文采用時(shí)間分辨熒光法結(jié)合RT-PCR Tth酶一步法檢測(cè)HCVRNA,微孔板通過預(yù)雜交使捕獲探針與微孔板相連,然后加入變性后的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物與捕獲探針雜交,洗板后用鏈霉親和素銪螯合物與擴(kuò)增產(chǎn)物5′端的生物素反應(yīng),在特定激發(fā)光波長(zhǎng)下發(fā)出熒光.2.時(shí)間分辨

2、熒光法是采用鑭系元素作為標(biāo)記進(jìn)行檢測(cè).3.在銪標(biāo)檢測(cè)中,我們使用了一種新型銪熒光螯合物SA-BHHCT-Eu<'3+>來完成丙型肝炎病毒的檢測(cè),并將它與應(yīng)用于酶標(biāo)法中的SA-HRP進(jìn)行比較.4.在臨床標(biāo)本的測(cè)定中,銪標(biāo)檢測(cè)法的靈敏度和特異性同樣優(yōu)于酶標(biāo)檢測(cè)法.5.從重復(fù)性檢測(cè)的結(jié)果中,我們看到兩種方法的CV值分別為10.43﹪和16.25﹪.CV值可以很好地反應(yīng)測(cè)定方法的重復(fù)性,上述結(jié)果顯示,銪標(biāo)檢測(cè)法的重復(fù)性明顯優(yōu)于酶標(biāo)檢測(cè)法.6.在