馬鈴薯脫毒苗的RT-PCR檢測技術研究.pdf

1、山東農業(yè)大學碩士學位論文馬鈴薯脫毒苗的RTPCR檢測技術研究姓名：孫琦申請學位級別：碩士專業(yè)：作物遺傳育種指導教師：張春慶2003.6.17越隸嵌娩走掌鞭嚳縫論交馬鈴蔫攔毒苗的litPCR檢舅技術研究纂蔓毽鈴薯薅毒璃遵彰虢罵鈴裝生產戇重要囂予。解決這一滴題豁：霎妥逡徑就是培養(yǎng)髓鴦姚拳申薯或狩茵，瞧脫毒菌最蠢寵全脫毒囂經檢測才能誠實。本文主要五究了橙染馬鈴謦的兩種主要瘸攥，即馬鈴簿1『瘸霉(Potatov注撼Y戳幫≥警馬簧萋X瘸簿(Pot

2、ato～irusX，PVX)瞧愛轉錄PCR一(RTPCR)檢測技術。并將這蝗技術與方法應用于生產祥晶的稔滴：、磷、過本實驗，可以銜到瀲下結論；l。凌避了黔淑攆鬏方法幫茬疆褰露不麓入液蒙粕入氯蘩采掇鍘RNase的作用。遺～改進應掰予“一步法”每“CTAB法”并獲得了殘功。2鵝改遴的“CTAB法”成功鮑提取丁馬鈴驀塊莖巾的RNA，這種方法譽餐去多耱魄狡褥交囂盛節(jié)謄戎本，攮露薄荸。3對騖鈴薯X瘸毒靜jE隸分離物與福遞分離揍的蕊嗣拳剄進囂魄較楚

3、箕夕殼蛋嬲旗因序列的嗣源區(qū)設計一對引物，建立了馬鈴薯X稽毒魏艇’PCR撿灝薅搴。4對馬鈴薯￥瘸毒黲兩個攘系，N轅累(PVY“)與O株系(PVY％的旗豳序列進行比較，在箕外凇蚤白睜歹U閽源區(qū)設計～對Sf翰，建立了pVy“與w≯’邋躐黲PV￥薅薅RTPCR鹼測俗夏。5?！贻^馬鈴鬻Y病毒的N株系與。株系的基因序硎，雀筒源匿的～處設計一條3’引搦，在葵上游的差舜醒兩鏈～個依據N株系。另一個議撂。撩系分弱設i中了磋釜5‘差器引戇，建立了霹臻意馬鈴