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1、分類號(hào):——密級(jí):——學(xué)號(hào):2013兒000882遣掌師筢大學(xué)碩士學(xué)位論文間隙孔主導(dǎo)的介孔MOFs作為載體在固載酶方面的應(yīng)用及性能評(píng)價(jià)作者姓名:學(xué)科、專業(yè):研究方向:導(dǎo)師姓名:王珊分析化學(xué)生化分析與生物傳感楊梅教授2016年06月遼寧師范大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要金屬有機(jī)骨架(MOFs)由于具有多孔性,孔徑大小可調(diào)解性,超高的比表面積和結(jié)構(gòu)多樣性等優(yōu)點(diǎn)受到了研究者的極大青睞。但由于大多數(shù)合成的MOFs材料是微孔結(jié)構(gòu),這使其在固載大分子酶和蛋白
2、方面受到了限制。間隙孔主導(dǎo)的MOFs(IPDmesoMOFs)是一類具有介孔結(jié)構(gòu)的新型金屬有機(jī)骨架材料。本實(shí)驗(yàn)根據(jù)文獻(xiàn)方法合成了兩種IPDmesoMOFs,并選擇辣根過(guò)氧化物酶(HRP)為模型酶,對(duì)合成的IPDmesoMOFs固載酶的能力進(jìn)行了評(píng)價(jià),具體內(nèi)容如下:1IPDmesoMOF2和IPDmesoMOF3的合成分別以九水合硝酸鋁和乙酸銅為中心金屬離子源,以對(duì)苯二甲酸和均苯三甲酸為配體,以三羥甲基丙烷為間隙孔填料,在乙醇為溶劑的條件
3、下,采用溶劑熱法合成了IPDmesoMOF2、IPDmesoMOF3。得到的產(chǎn)物分別經(jīng)X射線衍射(XRD)、傅里葉紅外光譜(FTlR)、掃描電子顯微鏡(SEM)進(jìn)行了結(jié)構(gòu)和形貌表征。通過(guò)氮?dú)馕剑摳綄?shí)驗(yàn)對(duì)兩種材料的比表面積、孔徑和孔體積進(jìn)行了測(cè)定,結(jié)果與文獻(xiàn)值一致,表明我們成功地合成了兩種間隙孔MOFs材料。2在線固定HRP及對(duì)H202的定量檢測(cè)首先,在靜態(tài)條件下通過(guò)優(yōu)化溶液pH值、酶的濃度、攪拌時(shí)間等初步研究了IPDmesoMOFs
4、對(duì)HRP的吸附性能。在此基礎(chǔ)上,利用順序注射一紫外系統(tǒng)對(duì)兩種IPDmesoMOFs材料在線固載酶的能力進(jìn)行了評(píng)價(jià)。從SEM、XRD、FTIR以及氮?dú)馕剑摳綄?shí)驗(yàn)結(jié)果中可以看出,在線固載HRP的IPDmesoMOFs的比表面積和孔體積發(fā)生了明顯的改變,說(shuō)明HRP成功的進(jìn)入了IPDmesoMOFs材料的孔道內(nèi):同時(shí)也證明固載HRP后,IPDmesoMOFs材料的結(jié)構(gòu)并沒(méi)有發(fā)生坍塌。最后,利用鄰苯二胺(OPD)作為色原底物,考察了所得固定化
5、酶對(duì)H202的催化性能。結(jié)果表明:以兩種IPDmesoMOFs為載體在線制備的固定化HRP,對(duì)于濃度范圍為003亂10mmol/L的H202具有良好的線性關(guān)系,檢出限分別為60pmol/L和50Itmol/L。米氏常數(shù)的測(cè)定結(jié)果顯示了固定酶比游離酶的活性更高。固定化的酶經(jīng)過(guò)30次的反復(fù)使用并放置一個(gè)月后仍然有較高的活性,說(shuō)明了合成的IPDmesoMOFs是固定酶的良好載體。關(guān)鍵詞:間隙孔主導(dǎo)的介孔金屬有機(jī)骨架;固定化酶;順序注射系統(tǒng);辣
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