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1、采用室內(nèi)離體葉片測定法和活體成株生物測定法、酶聯(lián)免疫檢測(ELISA)、電鏡觀察組織病理變化等技術(shù)方法,初步研究了轉(zhuǎn)抗蟲基因水稻對二化螟的抗蟲作用?! ≡趯嶒炇覂?nèi)采用荸薺和茭白等半人工飼料替代水稻苗成功飼養(yǎng)二化螟種群,為課題研究提供了蟲源保障?! 〔捎肊LISA方法,對MSA和MSB品種(均為轉(zhuǎn)Cry1Ac/CpTI雙價抗蟲水稻(Oryzasativa)純合株系)的稻中Bt蛋白含量進行檢測。Cry1Ac殺蟲蛋白基因在轉(zhuǎn)Cry1Ac/
2、CpTI雙價抗蟲水稻(Oryzasativa)各部位中均得到了表達。不同水稻生育期及不同部位Cry1Ac殺蟲蛋白的表達量均有所不同??偟内厔菔巧捌诘谋磉_量較生育后期高。在時間上,主莖葉片中的殺蟲蛋白在拔節(jié)期最高,孕穗期開始下降,在揚花期和和灌漿期達到最低,到成熟期略有回升;主莖中的殺蟲蛋白在苗期、拔節(jié)和揚花期較高,種子中含量很低。采用離體葉片測定法對二化螟幼蟲進行生物學(xué)測定?! 〔捎秒x體葉片測定法比較了三種轉(zhuǎn)不同抗蟲基因水稻對二化
3、螟的抗蟲效果差異。結(jié)果顯示,轉(zhuǎn)基因水稻品種MSB(Cry1Ac/CpTI雙價基因)C對二化螟的毒殺效果明顯高于其它轉(zhuǎn)基因水稻品種。二化螟在取食后第4天,取食MSB各個時期的主莖頂葉的幼蟲死亡率在苗期、分蘗期、拔節(jié)期均達到了100%,取食81AS1(轉(zhuǎn)CpTI基因)86AS2(轉(zhuǎn)CpTI基因)86AB(轉(zhuǎn)cry1Ac基因)、86AB2(轉(zhuǎn)cry1Ac基因)各個時期的主莖頂葉的幼蟲死亡率大多數(shù)時期僅在30%左右,在81AS1、86AS2、8
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