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1、湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)博士學(xué)位論文柑橘體細胞胚發(fā)生的細胞學(xué)及生理生化特性研究姓名:劉華英申請學(xué)位級別:博士專業(yè):植物學(xué)指導(dǎo)教師:肖浪濤20031101發(fā)生不同時期,蛋白質(zhì)組分無明顯變化,僅在表達量上有差異。4內(nèi)源激素水平和激素平衡對柑橘體胚發(fā)生起重要的調(diào)節(jié)作用。愈傷組織在長期繼代培養(yǎng)過程中胚性能力的保持需要較高水平的cTK、1AA和ABA,GA3具有負作用。具有不同胚性能力的材料之間,隨著胚性能力的下降,其內(nèi)源CTK、IAA和ABA水平也下降,G
2、A3則升高。ABA與clx、MA之間的平衡使胚性愈傷組織在繼代培養(yǎng)時保持在胚性狀態(tài),不向體胚發(fā)生方向進行。分化培養(yǎng)后,GA3、IAA明顯降低,ABA明顯升高,形成AB~cTK和ABA,IAA峰值,有利于胚性能力的表達,形成多細胞原胚。2030d,較低水平的ABMAA比值和IA刖cTK水平的回升,導(dǎo)致球形胚難以進一步發(fā)育和次生胚形成。體胚發(fā)生能力越弱的材料其內(nèi)源激素變化規(guī)律越接近非胚性愈傷組織。本研究還表明,IAA氧化酶活性與內(nèi)源№~代謝
3、密切相關(guān);向培養(yǎng)基中釋放是內(nèi)源激素代謝的另一種途徑。此外,采用梯度洗脫在柑橘愈傷組織內(nèi)源激素的HPLC分析中的分離效果較好。5優(yōu)化了植物多胺的腫Lc測定條件,確定在37℃苯甲?;磻?yīng)30Inin,檢測波長230姍,流速O7m1mino效果最佳。在此基礎(chǔ)上,對柑橘愈傷組織內(nèi)源多胺進行了分析,發(fā)現(xiàn)柑橘體胚發(fā)生能力與內(nèi)源多胺水平正相關(guān),無體胚發(fā)生能力的非胚性愈傷組織內(nèi)源多胺水平低。分化培養(yǎng)早期,較高的Put及多胺含量的增加有利于柑橘體胚發(fā)生,
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