蕓豆高效根瘤菌的篩選及分子標(biāo)記.pdf

1、該研究選用兒種不同的蕓豆品種,采用蛭石和土壤做基質(zhì)來與不同的蕓豆根瘤菌進行匹配試驗,篩選廣譜性的高效共生根瘤菌,并應(yīng)用分子標(biāo)記技術(shù)進行跟蹤檢驗.蛭石盆栽篩選采用20株不同的根瘤菌接種北京黑蕓豆和日本紅蕓豆,以地上部干物重、有效瘤數(shù)、有效瘤重、固氮酶活性為指標(biāo),初步篩選到了四株高效根瘤菌,分別為CCBAU03244、CCBAU01367、CCBAU65266、CCBAU65121.土壤盆栽篩選采用10株根瘤菌(其中包括蛭石初步篩選到的四株

2、高效根瘤菌),分別與4個蕓豆品種及4種土壤類型來匹配試驗,結(jié)果表明,以地上部干物重、有效瘤重、有效瘤數(shù)以及根干重為篩選指標(biāo),CCBAU65121在所有匹配試驗中接種效果都好;CCBAU03244除了種植于黃土中的效果不如對照外,種植于其他土壤中的效果均好;CCBAU01367、CCBAU65266除了個別匹配效果不好外,大多匹配試驗效果也不錯;其余各菌株與不同的蕓豆品種、在不同的土壤類型中都有嚴格的匹配關(guān)系.為了對接種根瘤菌進行跟蹤檢驗

3、,該研究采用RAPD、Box-PCR以及報告基因Lux-AB三種標(biāo)記方法,對回接根瘤進行了標(biāo)記實驗.RAPD和Box-PCR結(jié)果表明所選根瘤菌之間有差異性,但該方法的穩(wěn)定性差,并未在根瘤中檢驗到所接根瘤菌.利用三親本雜交方法,已經(jīng)成功地將熒光片斷Lux-AB導(dǎo)入了供體根瘤菌CCBAU01367、CCBAU65266和CCBAU65121.但在接合子回接結(jié)瘤試驗中,尚未檢測到發(fā)光根瘤,有待進一步優(yōu)化條件來驗證.為了保證高效菌株應(yīng)用于生產(chǎn)上