根瘤菌菌劑研究.pdf

1、選取豌豆根瘤菌三葉草生物型(Rhizobiumleguminosarumbv.trifolii)TA1和華癸中生根瘤菌(Mesorhizobiumhuakuii)7653R作為供試菌，測定了根瘤菌在YMA、BSE、TY、SM、PA和Alrarezmannitalmedium(AMM)等六種培養(yǎng)基中生長的0D值曲線。結果表明：供試菌在YMA和BSE上生長較快，在PA中幾乎不生長，TAl在AMM中幾乎不生長，但7653R在該配方中有明顯生長

2、且快于SM。供試菌雖然在BSE中生長速度最快，但配制BSE的步驟較為復雜，并需要大量豆芽，培養(yǎng)基的質量常取決于豆芽的優(yōu)劣。相比之下YMA配制方便，質量也易于控制，是工業(yè)生產(chǎn)根瘤菌劑的合適培養(yǎng)基。 本研究測定了供試菌在YMA中的生長曲線和相應的OD值曲線，并通過作圖比較了兩種曲線的相互關系。在YMA中生長時，7653R的代時為6.6小時；TAl為2.9小時。在此基礎上制備了供試菌固體和濃縮液體菌劑，并比較測定了根瘤菌在供試菌劑中經(jīng)

3、不同保存時間之后的活菌數(shù)。 供試固體菌劑分別以草炭、蛭石和珍珠巖為載體，在測定載體相關物理化學性質的基礎上，通過對載體進行含水量和pH值的預處理，加入適量根瘤菌培養(yǎng)液之后制成固體菌劑。比較測定了根瘤菌在3種供試固體菌劑中于室溫下保藏的存活率，結果表明：在武漢3月到9月的測定時間內，草炭菌劑的存活率最高、珍珠巖菌劑次之、蛭石菌劑最低。兩供試菌的活菌數(shù)一般在30天內呈增長趨勢，在以后五個月的存放中各供試固體菌劑的活菌數(shù)均逐漸回落。其

4、中7653R在草炭劑型中的最高活菌數(shù)可達37.0億/克，TAl在蛭石劑型中可達7.0億/克。供試菌在草炭劑型中的活菌數(shù)下降均較蛭石和珍珠巖劑型慢。 本研究還制備了濃縮液體菌劑，并測定了其在4℃冰箱中保存的活菌數(shù)。結果表明：雖然7653R比TAl有更高的起始菌數(shù)，但兩種供試菌在濃縮液體劑型中的活菌數(shù)均隨著保藏時間的延長而不斷減少，并在真空和N2中的保藏效果有明顯的差異：TAl在真空中保藏較好，而7653R在N2中較好。TAl在N2

5、中的活菌數(shù)下降較快，一個月后已降至起始菌數(shù)的l/l0左右。 為提高濃縮液體菌劑的保藏效果，本研究比較測定了苯甲酸鈉、對羥基苯甲酸和對羥基苯甲酸乙脂等三種抑菌劑的最佳使用濃度。結果表明：三種供試抑菌劑均只在其最佳濃度時才對根瘤菌有最好的保藏效果，濃度偏高和偏低時效果下降，濃度更高時甚至有殺菌作用。其中苯甲酸鈉的最佳應用濃度為30mg/L，對羥苯甲酸為5-7mg/L，對羥苯甲酸乙脂為2-5mg/L。另選取海藻糖作為保護劑，比較測定了