小鼠早期胚胎發(fā)育過程中iNOS和nNOSmRNA的表達(dá).pdf

1、一氧化氮(nitric oxide,NO)是一種具有自由基性質(zhì)的生物活性分子,能溶于水并具有脂溶性,化學(xué)性質(zhì)非常活躍,作為一種小分子氣體信號分子,NO在機(jī)體防御、神經(jīng)信號傳導(dǎo)、血管擴(kuò)張等生理過程中發(fā)揮著重要的作用.生物體內(nèi)的一氧化氮由一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)催化L-精氨酸(L-arginine,L-Aig)脫胍基產(chǎn)生L-胍氨酸(L-citrulline,L-Cit)而成,哺乳動物有三種不同構(gòu)型的

2、NOS,即神經(jīng)型一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthase,nNOS)、內(nèi)皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(inflammatory or macrophage nitric oxide synthase,iNOS).NOS是一氧化氮生成過成中的限速酶,因此某一組織中NOS的量能線性反應(yīng)出該組織中NO的量.近年來有許多研究

3、表明NO在體內(nèi)外早期胚胎發(fā)育中具有重要的調(diào)節(jié)作用.動物早期胚胎的發(fā)育是個體發(fā)育的重要階段,其發(fā)育過程受體內(nèi)許多因素(包括NO)的調(diào)節(jié)和影響.人們已從多個方面對早期胚胎發(fā)育過程作了大量的研究,然而對NO在早期胚胎中可能產(chǎn)生的生理調(diào)節(jié)作用了解較少.為了探討NO對小鼠附植前胚胎發(fā)育的影響,采用反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(reversetranscription-polymerase RT-PCR)方法檢測了附植前各發(fā)育時期胚胎中nNOS和iNOS的

4、mRNA的表達(dá)情況,用目的基因與內(nèi)參照管家基因β-actin的引物共同擴(kuò)增cDNA后,進(jìn)行PCR產(chǎn)物的瓊脂糖凝膠電泳,可見692bp和554bp處有明顯的兩條帶.結(jié)果表明:小鼠囊胚中觀察到有iNOS mRNA的表達(dá),小鼠1-細(xì)胞期、2-細(xì)胞期、4-細(xì)胞期和8-細(xì)胞期胚胎以及桑椹胚中沒有觀察到iNOS mRNA的表達(dá);而1-細(xì)胞期、2-細(xì)胞期胚胎中nNOS mRNA表達(dá)明顯,且1-細(xì)胞期胚胎比2-細(xì)胞期胚胎表達(dá)量稍高.這表明NO參與了小鼠