日本柑桔黃龍病菌電鏡觀察及PCR檢測.pdf

1、柑桔黃龍病是由韌皮部桿菌Candidatus Liberibacter引起的一種柑桔毀滅性病害,在多個國家與地區(qū)均有發(fā)生.該病在日本1988年于沖繩縣西表島初次發(fā)現(xiàn),隨后河野于1994年在沖繩本島發(fā)現(xiàn)該病并確認,近年來在日本有向北擴展的趨勢,最近在鹿兒島縣奄美大島也有發(fā)現(xiàn).自1970年Bove等用電鏡觀察到柑桔黃龍病病原以來,電鏡觀察一直是作為一種重要的鑒定和診斷手段,后來基于擴增16S rDNA特異性片斷的PCR檢測方法成了柑桔黃龍病

2、檢測的主要方法.由于柑桔黃龍病病原只存在于韌皮部篩管細胞中,而對柑桔葉片維管組織固定比較困難.該研究通過對材料細切,小心去掉木質部部分以便于固定.由于植物組織中都含有一定的空氣,致使樹脂不能順利浸潤細胞器,這就給材料包埋帶來困難,這可以通過在預包埋過程中處以真空處理以抽出植物組織中的空氣,以便更好包埋.該研究對日本柑桔體內的柑桔黃龍病原菌的形態(tài)結構進行了電鏡觀察,并與發(fā)生在其它地區(qū)的柑桔黃龍病的病原進行了比較,結果表明柑桔黃龍病病原體存