竹酢粉對(duì)斷奶仔豬生產(chǎn)性能、免疫機(jī)能及腸道微生物區(qū)系的影響.pdf

1、在豬生產(chǎn)中，尋求生態(tài)綠色促生長(zhǎng)添加劑，是動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料科學(xué)的研究熱點(diǎn)之一。本試驗(yàn)研究了竹酢粉(bamboo vinegar powder, BV)的主要化學(xué)組成及其在日糧中添加對(duì)斷奶仔豬生產(chǎn)性能、腹瀉指標(biāo)、小腸組織形態(tài)學(xué)指標(biāo)、血液生理生化指標(biāo)、免疫相關(guān)基因mRNA水平與腸道微生物區(qū)系的影響。選擇31日齡體重相近（6.74±0.17kg）的杜洛克×長(zhǎng)白×大約克斷奶去勢(shì)公仔豬45頭，隨機(jī)均分至5組，分別為:(1)對(duì)照組(Control，CO

2、N)，飼喂無(wú)抗生素及竹酢粉的基礎(chǔ)飼糧;(2)抗生素組（Antibiotics，ANT），基礎(chǔ)飼糧中添加0.12％復(fù)合抗生素（10％桿菌肽鋅0.008％、10％抗敵素0.004％、10％洛克沙砷0.01％及載體）;(3)0.1％竹酢粉組(BV1);(4)0.5％竹酢粉組(BV5);(5)1.0％竹酢粉組(BV10)，(3)～(5)組分別在基礎(chǔ)日糧中添加0.1％、0.5％和1.0％竹酢粉。每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)3頭。試驗(yàn)期35天，31日齡-

3、53日齡為試驗(yàn)前期，53日齡-66日齡為試驗(yàn)后期。整個(gè)研究包括如下四個(gè)部分:
　　1、竹酢粉成分分析及其對(duì)斷奶仔豬生產(chǎn)性能的影響
　　竹酢粉成分分析采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)。試驗(yàn)期間，記錄與計(jì)算平均日增重(ADG)、平均日采食量（ADFI）與料重比(F/G)，并測(cè)定腹瀉率與腹瀉指數(shù)。試驗(yàn)結(jié)束時(shí)測(cè)定器官指數(shù)及胃與小腸內(nèi)容物pH值。試驗(yàn)結(jié)果表明:(1)竹酢粉主要組分為酚類、醛類、有機(jī)酸、酮類及雜環(huán)類等化合物;(2)試驗(yàn)前期，B

4、V1組和BV10組ADG有高于CON組的趨勢(shì)（P＜0.1），BV5組ADG顯著高于CON組(P＜0.05)，BV5組料重比相對(duì)CON組有降低的趨勢(shì)（P＜0.1）;(3)試驗(yàn)后期，ANT組、BV1組和BV5組腹瀉率及腹瀉指數(shù)均顯著低于CON組（P＜0.05），并以BV5組最低;(4) BV5組胃液pH低于CON組46％(P＜0.1)，并顯著低于ANT組(P＜0.05)。
　　2、竹酢粉對(duì)斷奶仔豬小腸組織形態(tài)的影響
　　采集十二

5、指腸、空腸和回腸組織，制作常規(guī)石蠟切片，HE染色，觀察、分析絨毛高度、隱窩深度、絨毛高度/隱窩深度和粘膜厚度等指標(biāo)。結(jié)果表明:飼糧中添加竹酢粉可顯著降低小腸粘膜隱窩深度(P＜0.05)，顯著增加各小腸段絨毛高度與隱窩深度比值(P＜0.05)，以BV5組空腸和回腸絨毛高度與隱窩深度比值最高。竹酢粉組空腸和回腸的絨毛高度亦有增加的趨勢(shì)（P＜0.1）。竹酢粉試驗(yàn)組腸絨毛較整齊規(guī)則、隱窩較淺;CON組和ANT組絨毛不規(guī)則、隱窩較深。試驗(yàn)結(jié)果提示

6、:竹酢粉能夠影響斷奶仔豬小腸組織形態(tài)，并以0.5％竹酢粉組最佳。
　　3、竹酢粉對(duì)斷奶仔豬血液生理生化指標(biāo)與免疫相關(guān)基因表達(dá)的影響
　　在53日齡與66日齡，前腔靜脈采血，測(cè)定血常規(guī)指標(biāo)、血清生化、抗氧化和免疫指標(biāo)。采集肝臟、脾臟、十二指腸和腸系膜淋巴結(jié)樣本，采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)TNF-α、IL1-β和IL-6 mRNA表達(dá)水平。試驗(yàn)結(jié)果表明:(1)相比CON組，ANT組和BV1組66日齡血液白細(xì)胞計(jì)數(shù)顯著降低(P

7、＜0.05)，BV5組66日齡白細(xì)胞計(jì)數(shù)與CON組無(wú)顯著差異(P＞0.05)。相比CON組，ANT組、BV10組53日齡紅細(xì)胞壓積顯著增加(P＜0.05);BV5組66日齡紅細(xì)胞體積分布寬度-標(biāo)準(zhǔn)差顯著降低(P＜0.05); BV1組66日齡血小板計(jì)數(shù)顯著增加（P＜0.05）。(2) BV5組53日齡血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶顯著低于ANT組(P＜0.05);相比CON組，ANT組和BV5組53日齡白蛋白顯著降低(P＜0.05)，ANT組和BV10

8、組66日齡堿性磷酸酶顯著增加(P＜0.05)。(3)添加竹酢粉可顯著提高血清谷胱甘肽過(guò)氧化物酶活性(P＜0.05)。(4)竹酢粉組十二指腸TNF-α、IL-1β和IL-6 mRNA表達(dá)水平有降低趨勢(shì)（P＜0.1），竹酢粉試驗(yàn)組脾臟IL-6 mRNA表達(dá)水平顯著低于ANT組(P＜0.05)。BV5組肝臟TNF-α和IL-1β mRNA表達(dá)水平顯著提高(P＜0.05)。BV10組腸系膜淋巴結(jié)TNF-α和IL-6mRNA表達(dá)水平顯著降低（P＜

9、0.05）。本試驗(yàn)結(jié)果提示:竹酢粉對(duì)斷奶仔豬血液生理生化指標(biāo)和免疫機(jī)能有一定調(diào)控作用。
　　4、竹酢粉對(duì)斷奶仔豬腸道微生物區(qū)系的影響
　　試驗(yàn)結(jié)束（66日齡）屠宰仔豬，采集仔豬結(jié)腸內(nèi)容物，應(yīng)用16S rRNA高通量測(cè)序技術(shù)分析竹酢粉對(duì)斷奶仔豬腸道微生物區(qū)系的影響。結(jié)果表明:(1) ANT組和BV1組操作分類單元(OTU)數(shù)目、菌群豐度指數(shù)(Chao1 index)和多樣性指數(shù)(Shannon index)等3個(gè)菌群多樣性指數(shù)

10、均顯著高于CON組(P＜0.05);BV5組和BV10組的上述3個(gè)菌群多樣性指數(shù)也均高于CON組。(2)竹酢粉可調(diào)控?cái)嗄套胸i腸道菌群組成，形成獨(dú)特的腸道微生物群落結(jié)構(gòu)，且BV5組和BV10組腸道微生物群落結(jié)構(gòu)和對(duì)照組的差異更大，在分層聚類樹(shù)狀圖中形成獨(dú)立分支;竹酢粉可提升腸道普雷沃菌屬（Prevotella）、考拉桿菌屬（Phascolarctobacterium）、布勞特氏菌屬（Blautia）等共生菌比例;降低鏈球菌屬（Strept