昆蟲病原線蟲共生細菌高毒力菌株的篩選及殺蟲活性物質(zhì)的研究.pdf

1、為尋找新的殺蟲毒素資源,開發(fā)新的殺蟲毒素基因,該研究自九個昆蟲病原線蟲品系中分離共生菌菌株80株,用生物測定方法對共生菌菌株的殺蟲活性進行評價,從中篩選高毒力菌株,研究其殺蟲活性物質(zhì),初步開展了共生菌殺蟲毒素的純化工作,主要結(jié)論如下:以玉米螟為供試昆蟲,對80個菌株進行了胃毒毒力和體重抑制率的測定,從中篩選出A24-6R、A24-1B和A24-19B三個菌株為高毒力菌株,進一步進行殺蟲活性物質(zhì)研究.在血腔毒力測定中,三個高毒力菌株在10

2、cell/μl的菌液濃度下僅需10μl 48h內(nèi)就能使大蠟螟老熟幼蟲在全部死亡.高毒力菌株中A24-1B為長桿形細菌,A24-6R為短桿形細菌.在對三個高毒力菌株相關(guān)影響因子的研究中表明,三個高毒力菌株經(jīng)高溫50℃處理10min后,殺蟲活性均有所降低,但對玉米螟幼蟲仍有較高的體重抑制率;經(jīng)高溫100℃處理10min后,三菌株均喪失了殺蟲活性,對玉米螟幼蟲體重抑制率較低;三個高毒力菌株在1 8W紫外燈照射下,隨著照射時間的延長,對玉米螟的

3、殺蟲死亡率和校正死亡率都呈逐漸下降的趨勢,在紫外照射120min時,完全喪失殺蟲活性.通過對三個高毒力菌株生長曲線的測定,可知Ⅱ型菌A24-6R比Ⅰ型菌A24-1B和A24-19B的繁殖速度快.以A24-19B為供試菌株,研究不同培養(yǎng)時間對高毒力菌株殺蟲活性的影響,結(jié)果表明A24-19B菌株發(fā)酵液對玉米螟的殺蟲校正死亡率和體重抑制率隨著培養(yǎng)時間的延長呈波浪形升高趨勢.A24-19B的發(fā)酵液對玉米螟初孵幼蟲的LC<,50>為7.46×10

4、<'9>cell/ml.測定了三個高毒力菌株對小菜蛾(Plutella xylostella)、甜菜夜蛾(Spodoptera exigua)、粘蟲(Mythimna separata)、黃粉蟲(Tenebrio molitor)幼蟲的胃毒毒力,結(jié)果表明,除黃粉蟲外,對其余三種供試鱗翅目昆蟲幼蟲均表現(xiàn)較高的胃毒毒力,具有較廣泛的殺蟲譜.提取了三個共生菌高毒力菌株的殺蟲活性物質(zhì),并初步進行了純化,得到殺蟲毒素粗提物,在提純過程中,殺蟲活性