24975.一種酸性脲酶的固定化研究

1、本得的研中不包大學(xué)或賦苯砥本江南大許論文被查閱和借閱，可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文，并且本人電子文檔的內(nèi)容和紙質(zhì)論文的內(nèi)容相一致保密的學(xué)位論文在解密后也遵守此規(guī)定。簽名：基星瑩導(dǎo)師簽名：日期：牟業(yè)瓦一旦摘要摘要酸性脲酶可以在酒中分解尿素，將尿素分解為氨和二氧化碳，從而達(dá)到降低酒中致癌物質(zhì)氨基甲酸乙酯的目的。本論文對本實(shí)驗(yàn)室的一株產(chǎn)酸性脲酶的菌種進(jìn)行了發(fā)酵：在7

2、L發(fā)酵罐中，菌體在前16h增長迅速，酶活在24h達(dá)到最大，為175U／mL。在25L發(fā)酵罐中的發(fā)酵情況為：菌體在前16h增長迅速，酶活在22h達(dá)到最大，為223U／mL。細(xì)胞破碎效果比較：在實(shí)驗(yàn)室提取少量酶時(shí)，適宜采用超聲波破碎；在大規(guī)模制備酶時(shí)，選擇高壓破碎進(jìn)行細(xì)胞破碎更優(yōu)。固定化酸性脲酶的最適海藻酸鈉濃度、氯化鈣濃度和殼聚糖濃度分別為20g／100mL、50g／100mL和039／100mL，最適固定化時(shí)間為25h，戊二醛的合適濃度

3、為01％，戊二醛的交聯(lián)時(shí)間為3h，酶的總固定化率為823％。固定化酸性脲酶的最適反應(yīng)溫度為40℃、最適pH為40、半衰期為74天、固定化酸性脲酶在25～55℃之間，酶有較好的熱穩(wěn)定性，相對酶活在80％以上、pH穩(wěn)定范圍為3~65，游離酸性脲酶的最適反應(yīng)溫度為35℃、最適pH為55、半衰期為28天。固定化酸性脲酶可以重復(fù)使用13次，總的尿素去除率達(dá)到60％左右。由于滲透及空間位阻的影響，金屬離子及有機(jī)酸對固定化酸性脲酶的影響作用沒有對游離

4、酸性脲酶的影響大。在黃酒酒精濃度范圍內(nèi)，酒精對固定化酶酶活影響不大。固定化酸性脲酶在連續(xù)使用過程中去除黃酒中尿素的效果：1509固定化酸性脲酶可以使4L黃酒中的尿素濃度從342mg／L降低至136mg／L，平均尿素去除率為60％。黃酒在固定化酸性脲酶中作用后，黃酒中主要的風(fēng)味物質(zhì)在含量上基本沒有改變。氨基甲酸乙酯的含量有所降低。按005U／mL的添加量向黃酒中加入酸性脲酶的粗酶粉、液體酶、產(chǎn)酸性脲酶的細(xì)胞粉，因細(xì)胞粉在經(jīng)過72h后仍然有