25174.海洋底棲硅藻nitzschiaconstrict的分離、培養(yǎng)及固定化研究

1、摘要摘要底棲硅藻是鮑、海參等名貴海洋經(jīng)濟(jì)動(dòng)物重要的餌料來源，從自然海域分離培養(yǎng)適于當(dāng)?shù)厮a(chǎn)養(yǎng)殖的優(yōu)良底棲硅藻餌料對海洋經(jīng)濟(jì)動(dòng)物的苗種生產(chǎn)具有十分重要的現(xiàn)實(shí)意義。本文采用淘沙過濾的方法對福建連江海域的底棲硅藻進(jìn)行了采集，并對其中一株分離得到的底棲硅藻生物學(xué)特性、培養(yǎng)條件、部分代謝產(chǎn)物的影響因子進(jìn)行了詳細(xì)研究，探討單一底棲硅藻作為海洋經(jīng)濟(jì)動(dòng)物幼體餌料的可行性和潛在應(yīng)用價(jià)值，為今后大規(guī)模高密度培養(yǎng)提供理論依據(jù)。另外，通過固定化包埋技術(shù)，對底棲

2、硅藻固定化培養(yǎng)、種質(zhì)保存以及藻菌共固定化培養(yǎng)進(jìn)行了初步研究。具體研究內(nèi)容和結(jié)果如下：1通過平板分離法分離得到底棲硅藻3株、浮游性硅藻2株。通過形態(tài)觀察對一株底棲硅藻初步鑒定為縊縮菱形藻Nitzschiaconstricta。營養(yǎng)成分分析表明，此株硅藻粗蛋白含量為726％，其中必需氨基酸含量達(dá)到占總氨基酸含量4312％，谷氨酸1456％；總不飽和脂肪酸含量大約占整個(gè)脂肪酸組成的483％。與其它種常見餌料硅藻相比，完全符合鮑魚等名貴水產(chǎn)經(jīng)濟(jì)

3、動(dòng)物的餌料要求，具有較高的餌料經(jīng)濟(jì)價(jià)值。2通過測定色素、比增長速率、干重等生長指標(biāo)得出，菱形藻的適宜生長溫度為18300C，鹽度1045‰，pH適應(yīng)范圍610，光照5001000lx，水體適應(yīng)范圍較廣。氮、磷、鐵、硅營養(yǎng)鹽濃度實(shí)驗(yàn)表明，在N03N1413mg／L、Nail2P03P087mg／L條件下生長良好；檸檬酸鐵鐵濃度適應(yīng)范圍00713mg／1，硅酸鈉硅濃度適應(yīng)范圍02323mg／L。3比較不同培養(yǎng)條件下菱形藻胞外多糖和蛋白積累情

4、況發(fā)現(xiàn)：溫度對菱形藻蛋白積累無顯著影響，對胞外多糖分泌影響顯著，240C條件下菱形藻胞外多糖分泌最高達(dá)6931tg／ml；當(dāng)鹽度10％o，不同培養(yǎng)時(shí)間內(nèi)的菱形藻蛋白積累無明顯差異，當(dāng)鹽度為30％o時(shí)，胞外多糖分泌最高為8401tg／ml；培養(yǎng)液中pH變化對胞內(nèi)多糖無明顯規(guī)律影響，當(dāng)pH8時(shí)，菱形藻蛋白和細(xì)胞總糖含量積累較好；硝酸氮濃度為75mg／1，菱形藻第10天蛋白含量最高為289l_tg／ml，胞外多糖分泌隨培養(yǎng)時(shí)間的延長而增加；磷

5、濃度的增加提高了菱形藻蛋白的積累，但在磷營養(yǎng)鹽限制的條件下更有利于培養(yǎng)前期藻細(xì)胞外多糖的分泌；當(dāng)檸檬酸鐵濃度為39mg／l時(shí)，菱形藻第15天‘7毫_一YIIl[1I18IIo[I7Ill1Ill9111I哩Ill__l_l____l___l_l_l____l。。o?！?。‘’‘。。。o。ooo‘o。。。。。?！籘’^__，’H^AbstractThebenthicdiatomsareessentialfoodsourceforpr

6、eciousmarineeconomicanimalssuchasabaloneandseacucumberetcIthasveryimportantsignificancetoisolatethegoodbenthicdiatomsfoodfromnatureformelocalaquacultgrewhichproducemarineeconomicanimalseedlingsInthepaper，benthicdiatomswe

7、recollectedbyscrapingsandandfilteringinLianjiangmaritimespaceinFujianThebiologicalcharacteristics，cultureconditionsandtheimpactfactorswhichaffectthemetabolicproductsoftheoneisolatedbenthicdiatomwerestudiedtoinvestigateth

8、epotentialapplicationvalueasfoodforaquacultureandtoaffordthetheoreticalbasisforalargescaleandhighdensitycultivationBesidestheimmobIilizationcultureofbenthicdiatom，germplasmconservationandalgalbacterialco—immobilizationwi

9、ththeembeddingtechniqueswereresearchedTheresultsindetailwerestatedasfollows：1ThreebenthicandtwoplanktonicdiatomswereacquiredbyspreadingplatingmethodOneofthebenthicdiatomswasidentifiedasNitzschiaconstrictabymorphologyobse

10、rvationThenutritionalingredientanalysisindicatethatthecrudeproteinlevelwas726％andtheessentialaminoacidwas4312％ofthetotalaminoacids，andglutamicacidwas1456％：theunsaturatedfattyacidwas483％ofthetotalfattyacidComparetootherco

11、mmonfooddiatoms，it’Sveryfitthefoodrequestsofmarineeconomicanimalssuchasabaloneandhasthegoodeconomicfoodvalue2Byevaluatingthepigments，growthrateanddryweight，thefavourableandoptimumcultureconditionsofNconstrictaaretemperat

12、ure1830。C，salinity1045‰，pH610andlightintensity500—1000lx，whichhasthewidesubjectrangeinthewaterThenitrogen，phosphorous，ironandsiliconconcentrationsindicatethatⅣConstrictagrowwellatN03N1413mg／L，NaH2P03一PO87mg／Landtheoptimu

13、mferriccitrateFeandsiliconconcentrationswasO0713g／1，023—23mg／L3TheproteinandexopolysaccharideyieldofNConstrictaunderthedifferentcultureconditiondsdemonstrate：thetemperatprehasnopositiveeffectonproteinproduce，butispositiv