應用脫羰秋水仙堿誘導去核法進行小鼠體細胞核移植的研究.pdf_第1頁
已閱讀1頁,還剩49頁未讀, 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權,請進行舉報或認領

文檔簡介

1、在核移植過程中,供體核(karyoplast)與受體胞質(zhì)(cytoplast)是重構胚的兩個重要組件,尤其后者對于促進核重塑及胚胎進一步發(fā)育至關重要.目前,人們主要是通過顯微操作機械性的去除核染色質(zhì)來獲得受體胞質(zhì).但該方法卻存在著技術要求高,耗費時間長,對細胞損傷大的缺點.近年來有人嘗試應用化學試劑誘導去除卵母細胞染色質(zhì),簡稱誘導去核(IE,Induced-enucleation).國外多家實驗室對該方法進行了一系列的研究,但并未對影響

2、誘導去核率的各因素作系統(tǒng)分析,且目前國內(nèi)尚無相關報道.因此該研究的主要目的是優(yōu)化脫羰秋水仙堿(Deme,Demecolcine)誘導去核程序,通過在昆明白小鼠上探索性的研究,為應用該方法進行大動物卵母細胞去核提供一定的資料和經(jīng)驗.在已有Deme誘導去核技術路線的基礎上,以昆明白小鼠卵母細胞為實驗材料,對影響去核率的幾個因素(包括Deme濃度、Deme處理起始時間和作用時間、卵母細胞的卵齡)逐次進行實驗.結果表明:激活卵母細胞在濃度為0.

3、4 μg/mL和0.5 μg/mL Deme-KSOM液中處理60 min的去核率分別為27.3%、33.3%,二者之間差異不顯著,但與0.6 μg/mL組(11.9%)相比差異顯著.卵母細胞在0~5 min之內(nèi)迅速放入0.5 μg/mL Deme-KSOM液中,處理60~180 min得到了相對較高的去核率(31.9%~24.5%).且激活后0 min起始Deme處理并作用60 min獲得了最高的去核率(31.9%),顯著高于作用30

4、 min時的去核率(11.5%),但與作用90min、180 min的去核率(29.3%,28.5%)相比差異不顯著.激活后10~15 min之內(nèi)進行不同時間Deme處理均取得了相對較低的去核率(5.7%~12.0%).卵齡為17~18 h的昆明白小鼠卵母細胞在激活后迅速放入0.5 μ g/mL Deme-KSOM液中處理60 min,其去核率為27.1%顯著的高于14~15 h和20~21 h組(7.3%,14.1%).依據(jù)優(yōu)化的De

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權或不適當內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論