豬體細胞核移植電融合參數(shù)的研究.pdf

1、為確定豬體細胞核移植中適宜的電融合參數(shù)，本研究用體外成熟46小時的豬卵母細胞為核移植受體，豬顆粒細胞為核移植供體，共進行了四個實驗。 實驗一探討了電脈沖強度對電融合效果的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，077kv／cm組的融合率(59.3％)明顯高于1.54 kv／cm組(38.6％)(P<0.05)，但其分裂率(77.8％)及桑椹胚／囊胚發(fā)育率(33.3％)與1.54 kv／cm組(75.0％，31.3％)差異不明顯(P>0.05)，僅顯著高

2、于2.31kv／cm組(52.2％，13.6％)(P<0.05)。實驗二研究了電脈沖時間對電融合效果的影響，結(jié)果脈沖時間為201μs組的融合率(68.0％)明顯高于30μs組和40μs組(42.7％和355％，P<0.05)；脈沖時間為20μs的分裂率(89.3％)和桑椹胚／囊胚發(fā)育率(24.2％)與30μs組(87.2％，234％)沒有顯著差異(P>0.05)，但其分裂率明顯高于脈沖時間為40μs組(60.5％)。實驗三探討了脈沖次數(shù)

3、對電融合效果的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，脈沖次數(shù)為1的處理組融合率(72.8％)明顯高于脈沖次數(shù)為2的處理組(56.0％)(P<0.05)，但兩組的卵裂率和桑椹胚／囊胚發(fā)育率沒有顯著差異(P>0.05)。實驗四研究了交流電對電融合效果的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在直流電脈沖前是否施加交流電(1.0v)對融合率(70.0％vs 76.0％)，分裂率(77.3％vs 75.0％)以及胚胎發(fā)育率(17.3％vs18.4％)均無顯著影響(P>0.05)。