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1、單倍體育種是指通過雌核途徑或雄核途徑誘導(dǎo)單倍體產(chǎn)生,其后對(duì)染色體進(jìn)行加倍,快速獲得可正常結(jié)實(shí)的純合個(gè)體,進(jìn)而選育出新品種的育種技術(shù)。本文主要從花藥培養(yǎng)和輻射花粉授粉兩方面來探討蘋果單倍體育種技術(shù)。
本研究分為兩個(gè)部分:⑴蘋果花藥培養(yǎng):主要以11個(gè)品種材料,通過單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)著重分析了基因型、預(yù)處理時(shí)間、蔗糖濃度、激素組合等因素對(duì)愈傷組織和胚狀體誘導(dǎo)的影響,建立了蘋果花藥培養(yǎng)體系。結(jié)果表明:不同品種花藥誘導(dǎo)能力差異明顯,祝
2、光胚誘導(dǎo)率高達(dá)34.3%,其次為紅星;以紅星蘋果為例,誘導(dǎo)蘋果胚狀體的適宜低溫處理時(shí)長(zhǎng)為20-32d;培養(yǎng)基中添加5%蔗糖時(shí),可明顯提高紅星蘋果胚誘導(dǎo)率;當(dāng)6-BA和NAA以2.0mg/L+0.1mg/L組合時(shí),富士和千秋的胚狀體誘導(dǎo)率最高;建立了蘋果花藥培養(yǎng)體系:胚誘導(dǎo)培養(yǎng)基:N6+2.0mg/L6-BA+0.1mg/L NAA+0.3%活性炭+5%蔗糖+0.75%瓊脂;植株分化培養(yǎng)基:MS+1.0-5.0 mg/L6-BA+0.1-
3、0.3mg/LIBA;通過蘋果花培胚發(fā)生途徑共得到22株再生植株,其中千秋10株,富士7株,丹霞3株,嘎啦2株。經(jīng)流式細(xì)胞儀鑒定倍性結(jié)果為:除2株千秋三倍體,1株千秋四倍體和1株富士四倍體外,其余植株均為二倍體。丹霞和嘎啦因植株幼小,暫無法取樣以確定倍性。⑵在蘋果孤雌生殖誘導(dǎo)單倍體:輻射花粉法是誘導(dǎo)蘋果孤雌生殖的重要手段,了解輻射后胚發(fā)育過程對(duì)提高單倍體誘導(dǎo)率很有必要。本研究利用500Gyγ射線照射珊夏蘋果花粉后,分別授于富士、王林柱頭
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