大白菜游離小孢子培養(yǎng)與單倍體育種技術(shù)應(yīng)用.pdf

1、為建立高效的大白菜游離小孢子培養(yǎng)體系，以引自國內(nèi)外的16個大白菜雜交種為試材進行游離小孢子培養(yǎng)，分析不同培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件對胚狀體發(fā)生、發(fā)育和植株再生的影響，探索小孢子植株倍性鑒定方法，并對獲得的DH群體的園藝學特性進行了鑒定。選取部分DH群體配制雜交組合，調(diào)查各F<,1>代群體的植物學性狀和經(jīng)濟性狀，測定了產(chǎn)量配合力。主要研究結(jié)果如下。 1．基因型是影響小孢子胚誘導(dǎo)的關(guān)鍵因素，不同試材的小孢子胚發(fā)生頻率有明顯差異，在16個品種中

2、有14個誘導(dǎo)得到了胚狀體，最高出胚率達10.16胚·蕾<'-1>。 2．培養(yǎng)基中添加0.05～0.20 mg·L<'-1>6-BA和0.10 mg·L<'-1>NAA，有利于提高小孢子胚狀體的發(fā)生率。 3．花蕾4℃下處理24 h，可以顯著提高小孢子胚的誘導(dǎo)率。 4．盛花期取材小孢子胚誘導(dǎo)率高于始花期和末花期。 5．萌發(fā)胚和子葉型胚可以直接發(fā)育成具有真葉的小植株。魚雷型胚有兩條成苗途徑：一是胚根伸長，子葉萌

3、發(fā)，與子葉型胚狀體成苗相似；另一種是經(jīng)脫分化，形成綠白致密的愈傷組織，再分化成幼苗。球型胚和畸型胚不能成苗。 6．MS+NAA0.1mg·L<'-1>是適宜的生根培養(yǎng)基。 7．小孢子植株的倍性，可以采用染色體計數(shù)的直接鑒定方法和比較器官、組織、氣孔和花粉粒大小的間接鑒定法進行鑒定。田間形態(tài)學鑒定與細胞學觀察結(jié)果的一致性達到了85％。 8．不同品種誘導(dǎo)產(chǎn)生的小孢子植株群體中，單倍體、雙單倍體、嵌合體、高倍體所占的比