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1、木薯為二倍體作物,其染色體數(shù)是2n=36條(Rogers D J,1963;JenningsD L,1976)。木薯為多年生熱帶植物,一般以莖稈進(jìn)行無(wú)性繁殖,且以收獲塊根為主,可通過(guò)組織培養(yǎng)的手段進(jìn)行無(wú)性快繁,所以很適合多倍體育種。 本試驗(yàn)以木薯莖段為材料,組培出二倍體木薯的組培苗,再以組培苗為試材,配以不同濃度的秋水仙素為誘變劑,處理不同時(shí)間后,在組織培養(yǎng)條件下(譚德冠等,2005),設(shè)法獲得木薯多倍體植株。還試驗(yàn)摸索出適合木
2、薯二倍體、多倍體組培苗的快繁體系的生長(zhǎng)、生根最佳培養(yǎng)基配方。并與二倍體進(jìn)行比較,建立一套適合于木薯多倍體鑒定的方法。其試驗(yàn)結(jié)果表明: 1、用不同激素配比,對(duì)華南124和ZM兩品種的木薯芽進(jìn)行誘導(dǎo),發(fā)現(xiàn)芽的生長(zhǎng)在兩品種間的差異很小。激素6-BA和KT對(duì)芽的誘導(dǎo)作用明顯;MS+6-BA2.0配方,無(wú)論對(duì)木薯芽的初代培養(yǎng)和叢生芽的繼代增殖培養(yǎng)效果都比較好。 2、木薯愈傷組織的誘導(dǎo)要比木薯芽的誘導(dǎo)難度大。單因素條件下,激素2,4
3、-D有誘導(dǎo)愈傷組織的能力;雙因素條件下,試驗(yàn)配方MS+2,4-D2.0+6-BA0.05誘導(dǎo)出愈率最高,達(dá)到92.86%;MS+2,4-D2.0+NAA0.1的誘導(dǎo)效果最好,出愈率比較高,且誘導(dǎo)出的木薯愈傷組織在適當(dāng)?shù)沫h(huán)境條件下能很快誘導(dǎo)出來(lái)芽。 3、木薯芽的發(fā)根非常容易。激素NAA誘導(dǎo)效果明顯比IAA和KT的效果好;配方MS+NAA2.0+6-BA0.05對(duì)根的影響最好。 4、從木薯愈傷組織中分化出芽的誘導(dǎo)試驗(yàn)表明,配
4、方MS+2,4-D2.0+NAA2.0能從愈傷組織中誘導(dǎo)出芽,再經(jīng)過(guò)較長(zhǎng)時(shí)間培養(yǎng)其根部還會(huì)有根尖的發(fā)生。 從木薯無(wú)菌苗的葉片誘導(dǎo)出愈傷組織,再?gòu)挠鷤M織中誘導(dǎo)出木薯芽是本試驗(yàn)的一次創(chuàng)新。 5、田間誘變多倍體常采用兩種方法,秋水仙素莖尖涂抹法和萌發(fā)芽浸泡法。從處理芽的綜合效果上來(lái)看,莖尖涂抹法誘變率達(dá)60%,要優(yōu)于萌發(fā)芽浸泡法的40%。 6、利用秋水仙素在組培體系的基礎(chǔ)上誘導(dǎo),其效果與田間誘導(dǎo)相當(dāng)。其誘變率均在40
5、%左右。 7、秋水仙素的濃度范圍在0.1%-0.5%之間,合適的時(shí)間在72小時(shí)之內(nèi)。在組織培養(yǎng)的條件下誘導(dǎo),適合短時(shí)間(48小時(shí)以下)和低濃度(0.5%以下)。 8、通過(guò)田間觀察,在形態(tài)學(xué)上,把誘變得到的多倍體植株與其二倍體植株進(jìn)行對(duì)照,差異明顯。具體表現(xiàn)為葉片變厚,葉色變深,木薯多倍體與二倍體葉片的氣孔大小、氣孔密度差異顯著;通過(guò)葉綠素含量和淀粉含量的測(cè)定,多倍體比二倍體差異明顯。 9、細(xì)胞學(xué)鑒定結(jié)果表明,木薯
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