紅樹莓組培快繁體系與試管苗褐化控制技術(shù)研究.pdf

1、本文通過對紅樹苺哈瑞太茲(Heritage)篩選不同外植體，研究不同植物生長調(diào)節(jié)劑對紅樹苺芽誘導(dǎo)、繼代增殖和生根誘導(dǎo)的影響，得出最佳培養(yǎng)基配方，最后成功的馴化移栽，建立紅樹苺組培快繁體系。同時進行紅樹苺試管苗褐化控制技術(shù)的研究，試圖找到控制紅樹苺組織培養(yǎng)各個階段褐化的有效措施。主要試驗結(jié)果如下:
　　1.紅樹苺組培快繁體系的建立
　　通過對外植體采集時間、芽類型和滅菌時間進行完全隨機試驗。試驗得出非裸芽為最佳的外植體，而最適

2、合非裸芽的滅菌時間為8min。在初代芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基試驗中通過6-BA、NAA和GA3進行正交試驗，得出最適合紅樹苺芽誘導(dǎo)的培養(yǎng)基為MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1 mg/L。在芽誘導(dǎo)中6-BA為主導(dǎo)因素。
　　在繼代增殖培養(yǎng)時通過6-BA、NAA和TDZ的正交試驗，得出最適合紅樹苺試管苗繼代增殖的培養(yǎng)基為MS+6-BA0.5mg/L+ NAA0.1 mg/L+TDZ0.5mg/L，起主導(dǎo)作用的仍為6-BA，與試驗結(jié)果一致。

3、
　　生根培養(yǎng)中通過對基本培養(yǎng)基類型、是否活性炭和IBA質(zhì)量濃度進行研究，得出最適合紅樹苺試管苗生根的培養(yǎng)基為1/2MS+活性炭0.5 g/L+IBA0.2mg/L。
　　本試驗通過對馴化天數(shù)的研究，表明移栽前的馴化對紅樹苺試管苗至關(guān)重要，極大的提高了移栽成活率。最佳馴化時間為3-5d，移栽成活率達到93％。
　　2.紅樹苺試管苗褐化控制技術(shù)的研究
　　通過研究不同外植體和滅菌方法對紅樹苺褐化的影響。試驗結(jié)果顯示

4、，分段式滅菌具有明顯優(yōu)勢，而非裸芽的褐化率低于裸芽和頂芽。因此，進行紅樹苺組織培養(yǎng)的最佳外植體為非裸芽，滅菌時間為4min+3min。暗培養(yǎng)對褐化的影響不顯著，可以降低褐化程度，同時暗培養(yǎng)會導(dǎo)致紅樹苺芽誘導(dǎo)的時間變長。
　　在繼代增殖中，本試驗通過在培養(yǎng)基中添加不同濃度的活性炭、EDTA、檸檬酸和Na2S2O3，得出活性炭和檸檬酸對控制紅樹苺試管苗褐化有積極作用。隨著活性炭含量的增加，褐化程度在不斷降低，但是增殖倍數(shù)也在不斷降低，

5、認為在控制紅樹苺褐化時，添加活性炭含量不宜超過2g/L。檸檬酸質(zhì)量濃度為6g/L時，褐化率達到最低，增殖倍數(shù)為7.17。添加EDTA不僅不會減輕褐化，反而增加了褐化率和褐化程度。添加Na2S2O3雖然會降低褐化率，但會加重褐化程度，使嚴重褐化的比例大幅增加。
　　當培養(yǎng)基中的Mg、 Fe含量為MS的1/2時，植株葉片會變黃，當Mg、 Fe含量提升為MS的2倍時，植株濃綠，無發(fā)黃現(xiàn)象。但Mg、 Fe加倍后會使褐化率升高為79.78％