小麥氮利用效率相關(guān)基因TaGDH的克隆與功能分析.pdf

1、小麥對(duì)肥料的需求量高，氮肥的利用率影響著小麥的產(chǎn)量，但目前我國小麥生產(chǎn)中氮肥利用率較低，因此進(jìn)行小麥氮利用效率的研究具有重要意義。本實(shí)驗(yàn)以探索小麥的氮高效利用的途徑為目標(biāo)，主要通過基因克隆的方法對(duì)與氮利用效率相關(guān)的谷氨酸脫氫酶基因進(jìn)行研究。主要結(jié)果如下;
　　在普通小麥品種中克隆出了TaGDH1基因gDNA全長序列。用二倍體（烏拉爾圖小麥UR1、擬斯卑爾脫山羊草Y162、粗山羊草Ae35）和四倍體栽培二粒DR441對(duì)普通小麥品種中

2、的TaGDH1基因的gDNA序列進(jìn)行所屬染色體組的區(qū)分。A、B、D組TaGDH1的gDNA全長分別為3032 bp、2996 bp和2987 bp，均由8個(gè)外顯子和7個(gè)內(nèi)含子組成。對(duì)6份小麥材料的TaGDH1基因gDNA序列進(jìn)行對(duì)比發(fā)現(xiàn)，A組序列有2種單倍型，含有4個(gè)InDel和3個(gè)SNP，B組序列有2種單倍型，含有1個(gè)InDel和2個(gè)SNP，D組序列未發(fā)現(xiàn)單倍型。
　　根據(jù)A組TaGDH1的gDNA序列的1900-1983 bp

3、處的插入/缺失差異，開發(fā)了InDel分子標(biāo)記，命名為TaGDHl a-InDel。利用中國春缺體-四體體系和泰農(nóng)18×臨麥6號(hào)RIL群體將這個(gè)標(biāo)記定位到5A染色體上，該標(biāo)記與SNP標(biāo)記Ku-c47168-562連鎖，距離為2.1 cM。
　　通過電子克隆的方法獲得小麥TaGDH4基因序列，并且在中國春中克隆出TaGDH4基因的cDNA序列，該序列全長為1932 bp，同時(shí)發(fā)現(xiàn)其存在兩種類型的可變剪接體，分別缺失了第5個(gè)和第13個(gè)外