AtABA2轉(zhuǎn)基因棉花的鑒定和生理表型分析.pdf

1、干旱是我國(guó)主要的自然災(zāi)害之一，常常給農(nóng)業(yè)生產(chǎn)帶來(lái)很大的損失，嚴(yán)重影響了我國(guó)的重要經(jīng)濟(jì)作物棉花的產(chǎn)量。棉花是一種優(yōu)良的天然纖維紡織原料，然而其種質(zhì)資源缺乏，常規(guī)棉花抗旱育種是較困難的。目前，隨著生物技術(shù)的發(fā)展，基因工程育種已成為一種有利的育種手段，即將外源基因通過(guò)生物技術(shù)轉(zhuǎn)入作物體內(nèi)，使其整合到基因組中并得到穩(wěn)定的遺傳和表達(dá)到達(dá)定向地改造生物形狀的目的。因此，培育耐旱、抗旱的棉花是從根本上解決干旱影響棉花產(chǎn)量的措施顯得非常重要。
　

2、　脫落酸(ABA)這種激素在植物中是非常重要的，它在種子發(fā)育中調(diào)節(jié)休眠方面起著關(guān)鍵的作用，同時(shí)調(diào)節(jié)氣孔的關(guān)閉，參與在植物逆境下的反應(yīng)。已知擬南芥中3種基因AtABA1,AtABA2,AtABA3在合成脫落酸(ABA)過(guò)程中起著關(guān)鍵的作用。本論文通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)提高棉花合成ABA（尤其在脅迫條件下）能力，以期提高棉花的耐旱性。
　　本論文以冀合713、coker201的胚性愈傷組織為受體，利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法成功導(dǎo)入了AtABA2基因。利

3、用花粉管通道法將AtABA2基因?qū)肓诵玛懺?5、36母、中棉所16三個(gè)品種，后者得到了大量的轉(zhuǎn)基因植株。利用田間噴灑抗生素和PCR鑒定的方法進(jìn)行篩選，將得到的陽(yáng)性植株擴(kuò)大培養(yǎng)。利用分子雜交技術(shù)確認(rèn)AtABA2基因已經(jīng)整合到T4帶轉(zhuǎn)基因棉花植株，且都是單拷貝。此外，我們分析了轉(zhuǎn)基因棉花和未轉(zhuǎn)基因空白對(duì)照植株在干旱脅迫處理后的AtABA2基因的表達(dá)情況，RT-PCR結(jié)果顯示轉(zhuǎn)基因棉花體內(nèi)AtABA2基因均有表達(dá)。并對(duì)轉(zhuǎn)AtABA2基因的棉