水稻抽穗期候選基因功能研究.pdf

1、水稻抽穗期作為水稻的重要農(nóng)藝性狀之一，與水稻的產(chǎn)量息息相關(guān)。抽穗期的長短直接體現(xiàn)了水稻生育期的長短，適宜的生育期在維持水稻高產(chǎn)中扮演重要角色。同時，抽穗期是決定水稻適宜種植區(qū)域的重要性狀。因此，對水稻抽穗期相關(guān)基因的定位和功能驗證對水稻育種具有重要的意義。
　　天津市農(nóng)作物研究所通過構(gòu)建“日本晴/羅2”的F2群體，利用圖位克隆的方法將抽穗期控制基因定位到水稻第Ⅲ號染色體上。后期通過精細定位，將抽穗期控制基因定位到6kb區(qū)間內(nèi)。定位

2、區(qū)間內(nèi)有兩個候選基因，分別命名為PRX34-1和PRX34-2。
　　本研究中，采用如下分子生物學(xué)方法對候選基因進行功能驗證。第一，構(gòu)建PRX34-2的啟動子功能分析載體，通過瞬時轉(zhuǎn)化煙草，來驗證啟動子的功能。第二，構(gòu)建PRX34-1和PRX34-2的原核表達載體，檢驗候選基因在原核細胞中的表達情況，并對表達產(chǎn)物進行酶活性分析。第三，構(gòu)建PRX34-1和PRX34-2的植物過表達載體，通過侵染擬南芥，并獲得轉(zhuǎn)基因植株;然后，觀察轉(zhuǎn)