溫度處理對黑線倉鼠生理、行為的影響及其分子機(jī)制研究.pdf

1、黑線倉鼠(Cricetulus barabensis)是我國主要的農(nóng)田害鼠之一,黑線倉鼠種群具有較高的繁殖力和明顯的繁殖節(jié)律,這是內(nèi)因(基因調(diào)控)和外因(環(huán)境因子)共同作用的結(jié)果。因此,開展黑線倉鼠種群繁殖機(jī)制和繁殖節(jié)律的研究就顯得尤為重要。本研究從黑線倉鼠繁殖的關(guān)鍵基因入手,結(jié)合其生存環(huán)境中的關(guān)鍵環(huán)境因子,以分子生物學(xué)方法為主,輔以生態(tài)學(xué)、生理學(xué)和行為學(xué)等手段,揭示害鼠種群繁殖節(jié)律和波動(dòng)機(jī)制,為鼠害的綜合防治提供新思路。
　　本

2、研究包括以下三個(gè)主要的實(shí)驗(yàn)研究:
　　實(shí)驗(yàn)研究一:采用RT-PCR的方法克隆黑線倉鼠促性腺激素釋放激素(gonadotropin-releasing hormone,GnRH)部分cDNA序列。GnRH是與繁殖相關(guān)的關(guān)鍵基因,在體內(nèi)分布廣泛、功能多樣、調(diào)控系統(tǒng)復(fù)雜,但普遍認(rèn)為其核心作用的通過下丘腦-垂體-性腺軸調(diào)控動(dòng)物的生殖。本研究共得到黑線倉鼠GnRH cDNA序列355bp,包括291bp的編碼區(qū)全序列,GeneBank登錄號(hào)

3、為KC608826。采用分子生物學(xué)軟件對其核苷酸序列、蛋白序列進(jìn)行分析,預(yù)測并分析其蛋白的二級結(jié)構(gòu)和三級結(jié)構(gòu)。本研究所得結(jié)果同時(shí)也為后續(xù)實(shí)驗(yàn)奠定了基礎(chǔ)。
　　實(shí)驗(yàn)研究二:對GnRH的差異表達(dá)和功能多樣性展開研究。首先采用熒光定量PCR的方法比較GnRH在雌雄黑線倉鼠亞成年期、成年期(♂)、成年發(fā)情間期(♀)、成年發(fā)情期(♀)以及老年期四個(gè)階段的中樞(下丘腦)和外周器官(性腺)中的相對表達(dá)量。結(jié)果發(fā)現(xiàn)GnRH的表達(dá)在不同組織間、不同

4、性別間、不同生長階段以及不同發(fā)情周期中均有明顯差異,體現(xiàn)了GnRH在黑線倉鼠生殖調(diào)控中的功能多樣性和調(diào)控的復(fù)雜性;然后通過對黑線倉鼠胃腸道GnRH表達(dá)的研究,證實(shí)了GnRH在黑線倉鼠胃腸道確有微量表達(dá),且表達(dá)量存在差異,為GnRH功能多樣性研究提供了補(bǔ)充。本研究結(jié)果同時(shí)也為后續(xù)實(shí)驗(yàn)提供了理論依據(jù)。
　　實(shí)驗(yàn)研究三:在收集并統(tǒng)計(jì)山東省近20年氣象資料基礎(chǔ)上,從影響黑線倉鼠生殖生長的關(guān)鍵環(huán)境因子入手,給黑線倉鼠設(shè)置不同的環(huán)境溫度,然后