馬傳染性貧血病Rev蛋白單克隆抗體的制備及表位鑒定.pdf

1、馬傳染性貧血病毒(EIAV)是反轉(zhuǎn)錄病毒科慢病毒屬成員之一，可引起嚴重的馬屬動物傳染病-馬傳染性貧血病(EIA)。慢病毒可不斷變異逃脫宿主免疫監(jiān)視，該特性是慢病毒疫苗很難研制成功的重要因素，而EIAV作為首個研制出疫苗并成功應(yīng)用的的病毒，被認為是研究慢病毒感染免疫機制的重要模型。Rev蛋白作為EIAV的輔助蛋白之一，主要承擔在病毒復(fù)制晚期向核外轉(zhuǎn)運未完成剪切的mRNA的作用，以促進病毒的組裝。所以，Rev在EIAV細胞內(nèi)復(fù)制中起著重要作

2、用。最新研究顯示，在疾病感染的不同臨床階段Rev會產(chǎn)生變異形成不同的亞型，因此，對其結(jié)構(gòu)和功能研究將對研制針對慢病毒的疫苗和藥物提供重要的基礎(chǔ)研究數(shù)據(jù)。
　　單抗是用于對蛋白功能進行研究的重要工具。為此，本研究通過PCR獲得Rev目的基因，通過雙酶切將其克隆到pET30a原核表達載體上，通過原核表達和蛋白純化，獲得純度高并具有免疫原性的Rev蛋白。用Rev蛋白免疫8周齡的BALB/c小鼠，通過細胞融合技術(shù)獲得了一株分泌針對Rev抗