復(fù)方中草藥和果寡糖對(duì)羅非魚(yú)免疫性能的影響.pdf

1、本論文研究了兩種免疫增強(qiáng)劑(復(fù)方中草藥制劑和果寡糖)對(duì)尼羅羅非魚(yú)血液免疫酶類(lèi)活性及其在脅迫條件下血液化學(xué)物質(zhì)變化的影響。研究分為三部分:
　　第一部分:復(fù)方中草藥對(duì)尼羅羅非魚(yú)血液非特異性免疫功能的影響
　　本實(shí)驗(yàn)研究了在飼料中添加一種以魚(yú)腥草為主要成分的復(fù)方中草藥制劑對(duì)尼羅羅非魚(yú)(Oreochromis niloticus)血液非特異性免疫功能(或指標(biāo))的影響。將魚(yú)腥草、黃芩、板藍(lán)根、連翹、金銀花等10種中草藥按一定比例充分

2、粉碎后混勻制成以魚(yú)腥草為主要成分的復(fù)方中草藥制劑,按質(zhì)量分?jǐn)?shù)0％(對(duì)照組)、1%(A組)、3%(B組)、6%(C組)分別添加到基礎(chǔ)飼料中投喂尼羅羅非魚(yú)(體質(zhì)量54±0.32g),共進(jìn)行為期12周的飼養(yǎng)試驗(yàn)。其中在第4、8、12周測(cè)定其血清免疫指標(biāo),并在第12周進(jìn)行采樣測(cè)定全血免疫指標(biāo)。試驗(yàn)結(jié)果表明:從第8周開(kāi)始,B組尼羅羅非魚(yú)血清丙二醛(MDA)含量降低極為顯著(P<0.01),而C組中尼羅羅非魚(yú)血清溶菌酶(LSZ)活力顯著提高(P<0

3、.05),超氧化物歧化酶(SOD)活力、一氧化氮(NO)含量提高極為顯著(P<0.01),并且MDA含量極顯著的降低(P<0.01)。至第12周,B組中尼羅羅非魚(yú)血清SOD活力和血細(xì)胞呼吸爆發(fā)活性極顯著提高(P<0.01),血清LSZ活力、NO含量顯著提高(P<0.05);C組中尼羅羅非魚(yú)血清SOD活力、NO含量、血清 LSZ活力、吞噬百分比、吞噬指數(shù)、呼吸爆發(fā)活力均極顯著提高(P<0.01),而MDA含量則降低極為顯著(P<0.01)

4、。結(jié)果表明:在飼料中添加3%和6%質(zhì)量分?jǐn)?shù)的以魚(yú)腥草為主要成分的復(fù)方中草藥制劑均能增強(qiáng)尼羅羅非魚(yú)的免疫力,其中以添加6%的質(zhì)量分?jǐn)?shù)的效果最好。
　　第二部分:果寡糖對(duì)尼羅羅非魚(yú)非特異性免疫及抗病力的影響
　　上述研究結(jié)果表明在基礎(chǔ)飼料中添加6%的復(fù)方中草藥可以有效提高尼羅羅非魚(yú)(Oreochromis niloticus)血液非特異性免疫功能。本實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖茄芯吭诤袕?fù)方中草藥的飼料中添加果寡糖(FOS)對(duì)尼羅羅非魚(yú)非特異性免

5、疫及抗病力的影響。分別在飼料中添加0(對(duì)照組)、1(A試驗(yàn)組)、3(B試驗(yàn)組)和5(C試驗(yàn)組)g/kg的果寡糖投喂尼羅羅非魚(yú)(體質(zhì)量3±2.43g),共進(jìn)行為期90d的飼養(yǎng)試驗(yàn)。在第30、60、90d分別取樣測(cè)定其血清免疫指標(biāo)及在試驗(yàn)結(jié)束時(shí)用無(wú)乳鏈球菌(Streptococcus agalactiae)對(duì)其進(jìn)行攻毒處理。試驗(yàn)結(jié)果表明:A組尼羅羅非魚(yú)血清溶菌酶(LSZ)活力和血清過(guò)氧化氫酶(CAT)活力均從第60d開(kāi)始與對(duì)照組相比差異顯著

6、(P<0.05),并分別于第60d和第90d達(dá)到最大值;其血清超氧化物歧化酶(SOD)活力在第30d后開(kāi)始顯著高于對(duì)照組(P<0.05),在第90d達(dá)到峰值;A組血清丙二醛(MDA)含量顯著低于對(duì)照組(P<0.05),并在第90d達(dá)到最低值;A組堿性磷酸酶(AKP)活性和血清中一氧化氮(NO)的含量與對(duì)照組相比差異不顯著(P>0.05)。B組尼羅羅非魚(yú)血清LSZ活力和堿性磷酸酶(AKP)在第60d后顯著高于對(duì)照組(P<0.05),分別于

7、第60d和第90d達(dá)到最大值;其血清SOD酶活力和過(guò)氧化氫酶(CAT)活力均從第30d開(kāi)始顯著高于對(duì)照組(P<0.05),分別于第60d和第90d達(dá)到最大值;B組血清MDA含量顯著低于對(duì)照組(P<0.05),在第60d達(dá)到最低值;B組中血液NO含量與對(duì)照組差異不顯著(P>0.05)。B組血清SOD活力和AKP活力第60d時(shí)與A組差異顯著(P<0.05),而B(niǎo)組CAT活力在第90天時(shí)與A組差異顯著(P<0.05)。C組的血清溶菌酶活力、血

8、清SOD活力、血清AKP活力、血清MDA含量、血清CAT活力和血清NO含量與對(duì)照組相比在各時(shí)間點(diǎn)均無(wú)顯著差異(P>0.05)。用無(wú)乳鏈球菌強(qiáng)毒株進(jìn)行腹腔注射攻毒,結(jié)果表明:A組和 B組的免疫保護(hù)率分別為55.81%和67.44%,可以顯著提高尼羅羅非魚(yú)對(duì)無(wú)乳鏈球菌的抵抗能力,降低其死亡率;C組的免疫保護(hù)率為6.9%,有輕微保護(hù)作用。
　　第三部分:兩種環(huán)境脅迫下果寡糖對(duì)羅非魚(yú)血液中皮質(zhì)醇及血糖的影響
　　上述研究結(jié)果表明在含

9、有6%復(fù)方中草藥的飼料中添加1～3g/kg的果寡糖可以有效提高尼羅羅非魚(yú)(Oreochromis niloticus)血液非特異性免疫功能。本實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖茄芯吭趦煞N環(huán)境脅迫條件下果寡糖(FOS)對(duì)羅非魚(yú)血液中皮質(zhì)醇(COR)及血糖(GLU)的影響。分別在含有6%的中草藥飼料中添加0 g/kg(對(duì)照組)、1 g/kg(A試驗(yàn)組)、3 g/kg(B試驗(yàn)組)和5 g/kg(C試驗(yàn)組)的果寡糖投喂尼羅羅非魚(yú),進(jìn)行為期90d的飼養(yǎng)試驗(yàn)。飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束

10、后,一部分試驗(yàn)魚(yú)進(jìn)行致病菌脅迫試驗(yàn):每組取25尾魚(yú),兩個(gè)重復(fù),對(duì)試驗(yàn)魚(yú)腹腔注射0.1mL濃度為1.0×106 cfu/mL的無(wú)乳鏈球菌(Streptococcus agalactiae),分別在0h、3h、12h、24h、36h、48h取血樣分析其血液中皮質(zhì)醇及血糖含量。另一組試驗(yàn)魚(yú)進(jìn)行擁擠脅迫試驗(yàn):每組取一定量的魚(yú),進(jìn)行連續(xù)48h的擁擠脅迫(35g/L)試驗(yàn),分別在0h、3h、12h、24h、36h、48h取血樣分析其血液中皮質(zhì)醇及血

11、糖含量。致病菌脅迫試驗(yàn)結(jié)果表明:各個(gè)組的血液皮質(zhì)醇及血糖含量在脅迫后前24h內(nèi)顯著提高,其中A組和B組與對(duì)照組相比差異顯著,C組與對(duì)照組差異不明顯;在第24h各個(gè)組都達(dá)到了最大值,但隨著時(shí)間的推移各組中COR及GLU含量逐漸下降,一段時(shí)間后恢復(fù)至與對(duì)照水平保持穩(wěn)定。擁擠脅迫試驗(yàn)結(jié)果表明:在試驗(yàn)前,各組魚(yú)血液中皮質(zhì)醇及血糖含量無(wú)明顯差異,試驗(yàn)后3h,所有組魚(yú)的血液皮質(zhì)醇及血糖含量都顯著上升,上升趨勢(shì)持續(xù)至第12h和第24h,其中A組和B組