團(tuán)頭魴甘露糖受體基因的克隆與表達(dá)研究.pdf_第1頁
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1、甘露糖受體家族屬于C型凝集素超家族,是一組Ⅰ型跨膜蛋白。在甘露糖受體家族中,各成員之間的共同功能性特點(diǎn)是能在質(zhì)膜與內(nèi)體區(qū)室間循環(huán)再生,結(jié)合細(xì)胞外配體并傳送到胞內(nèi)區(qū)域。甘露糖受體(mannose receptor, MR)是甘露糖受體家族中的一員,在宿主防御和連接先天性—適應(yīng)性免疫上發(fā)揮重要作用。本研究對(duì)團(tuán)頭魴Megalobrama amblycephala甘露糖受體(maMR)基因進(jìn)行克隆和表達(dá)分析。
   使用簡(jiǎn)并引物擴(kuò)增得到

2、maMR的部分片段,使用RACE擴(kuò)增得到maMR cDNA的全長(zhǎng)5295 bp,該cDNA序列包含一個(gè)4302 bp的開放閱讀框,編碼1433個(gè)氨基酸,理論分子量163.496 kDa。與斑馬魚和舌齒鱸預(yù)測(cè)的巨噬細(xì)胞甘露糖受體1(macrophage mannose receptor1,MMR1)的相似性分別為77%和46%。結(jié)構(gòu)域搜索和多序列比對(duì)顯示maMR包含一個(gè)胞外富含半胱氨酸區(qū)域(cysteine-rich,CR),一個(gè)Ⅱ型纖連

3、蛋白重復(fù)區(qū)域(fibronectin typeⅡ,F(xiàn)NⅡ),8個(gè)連續(xù)的C型凝集素樣區(qū)域(C-type lectin-like domains,CTLDs),一個(gè)跨膜區(qū)和一個(gè)細(xì)胞質(zhì)尾巴區(qū)域。進(jìn)化分析顯示,maMR與斑馬魚預(yù)測(cè)的MMR1聚為一族。半定量RT-PCR顯示maMR在健康團(tuán)頭魴肝臟、脾臟、頭腎、體腎、心臟、鰓、腦、肌肉、腸道和血液中均有表達(dá),其中頭腎中表達(dá)量最高。實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析顯示經(jīng)滅活的嗜水氣單胞菌Aeromonas h

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