團頭魴甘露糖受體基因的克隆與表達研究.pdf

1、甘露糖受體家族屬于C型凝集素超家族，是一組Ⅰ型跨膜蛋白。在甘露糖受體家族中，各成員之間的共同功能性特點是能在質(zhì)膜與內(nèi)體區(qū)室間循環(huán)再生，結(jié)合細胞外配體并傳送到胞內(nèi)區(qū)域。甘露糖受體(mannose receptor, MR)是甘露糖受體家族中的一員，在宿主防御和連接先天性—適應(yīng)性免疫上發(fā)揮重要作用。本研究對團頭魴Megalobrama amblycephala甘露糖受體(maMR)基因進行克隆和表達分析。
　　 使用簡并引物擴增得到

2、maMR的部分片段，使用RACE擴增得到maMR cDNA的全長5295 bp，該cDNA序列包含一個4302 bp的開放閱讀框，編碼1433個氨基酸，理論分子量163.496 kDa。與斑馬魚和舌齒鱸預(yù)測的巨噬細胞甘露糖受體1(macrophage mannose receptor1，MMR1)的相似性分別為77％和46％。結(jié)構(gòu)域搜索和多序列比對顯示maMR包含一個胞外富含半胱氨酸區(qū)域(cysteine-rich，CR)，一個Ⅱ型纖連

3、蛋白重復(fù)區(qū)域(fibronectin typeⅡ，F(xiàn)NⅡ)，8個連續(xù)的C型凝集素樣區(qū)域(C-type lectin-like domains，CTLDs)，一個跨膜區(qū)和一個細胞質(zhì)尾巴區(qū)域。進化分析顯示，maMR與斑馬魚預(yù)測的MMR1聚為一族。半定量RT-PCR顯示maMR在健康團頭魴肝臟、脾臟、頭腎、體腎、心臟、鰓、腦、肌肉、腸道和血液中均有表達，其中頭腎中表達量最高。實時熒光定量PCR分析顯示經(jīng)滅活的嗜水氣單胞菌Aeromonas h