基于13C同位素示蹤技術的碭山酥梨果實糖積累的代謝譜分析.pdf

1、碭山酥梨(PyrusbretschneideriRehd.cv.Dangshansuli)分類上介于白梨和秋子梨之間,為我國栽培面積最大的梨品種之一,在我國和安徽省碭山地區(qū)有著悠久的栽培歷史。以園藝作物果實作為研究對象具有特殊性,其果實品質特性與形成機制不同于其他作物;另外在果實發(fā)育轉熟期,糖代謝相關酶活性具有明顯差異。通過研究與山梨醇代謝相關的關鍵代謝路徑,并為開展果實主要品質特征成分代謝研究提供適宜研究體系研究。
　　以謝花后

2、130天碭山酥梨果實為試材,采用13C-葡萄糖注入方法以及果實圓片培養(yǎng)并結合13C-葡萄糖飼喂處理的方法,收集不同時間點的處理后果實樣品,通過對酥梨高糖芽變果實和非變異果實中糖以及與糖代謝密切相關的重要果實品質特征成分的代謝譜分析。通過氣-質聯(lián)用技(GC-MS)進行樣品分析,并依據(jù)NIST和Wiley數(shù)據(jù)庫,對分析圖譜中各代謝物組分進行結構解析,尋找?guī)в袠擞浀钠咸烟谴x物,發(fā)現(xiàn)了不同酥梨試材出現(xiàn)顯著差異。
　　通過對GC-MS圖譜

3、進行濾噪、解卷積、基線校準和峰匹配處理得到代謝定量數(shù)據(jù),對果實13C-葡萄糖注入實驗匯總數(shù)據(jù)應用主成分分析(PCA)和偏最小二乘法分析(PLS)進行數(shù)據(jù)處理,得出變異果實在果實轉熟期生成大量的糖類,與對照組果實形成鮮明對比。有機酸總生成量在果實成熟過程中都有升高,但在變異和對照組果實中發(fā)現(xiàn)它們呈現(xiàn)的規(guī)律為前期變化小,變異與對照果實酸類生成量差距小;中后期波動大,變異果實有機酸類升高比率大于對照果實;后期酸類總量基本持平,為變異果實酸類含

4、量下降的比率大于對照組果實。通過三維圖結果顯示注射實驗和圓片實驗的高糖芽變果實和非變異果實能實現(xiàn)良好的模式分型,并獲取了注射實驗中供試材樣品分型貢獻值較大的代謝物信息(VIP),并對其中前20種變化較大的代謝物進行比對分析,得出這些代謝物的變化規(guī)律。
　　通過對葡萄糖數(shù)種標準品的質譜圖比對,得出糖代謝相關標記物的特征峰。并對圓片實驗中變異果實和非變異果實中帶13C標記的各代謝物組分進行結構解析,檢測了各標記組分在不同果實樣品中隨處