分子標(biāo)記在水稻分子育種中的有關(guān)應(yīng)用.pdf

1、為了加強(qiáng)分子標(biāo)記在現(xiàn)代水稻分子育種上的應(yīng)用,我們進(jìn)行了SSR標(biāo)記檢測(cè)雜交稻組合種子純度、分子標(biāo)記輔助選擇Bt抗蟲基因育種及分子標(biāo)記輔助選擇抗褐飛虱基因育種,主要結(jié)果如下:
　　一、SSR標(biāo)記具有數(shù)量豐富、多態(tài)性高、遺傳上呈共顯性、實(shí)驗(yàn)操作簡(jiǎn)單、結(jié)果穩(wěn)定可靠、引物序列易交流等優(yōu)點(diǎn),已成為雜交水稻純度鑒定的一種理想分子標(biāo)記。通過(guò)篩選分布于水稻12條染色體上的600個(gè)SSR標(biāo)記進(jìn)行多態(tài)性分析。用吐溫法快速提取DNA,利用RM3、RM30

2、4和RM475等標(biāo)記鑒別參與研究的21個(gè)雜交稻組合及其17個(gè)親本,對(duì)雜交稻種子的純度進(jìn)行了鑒定,獲得了令人滿意的結(jié)果。
　　二、通過(guò)傳統(tǒng)雜交的方法將華中農(nóng)大的三個(gè)Bt明恢63中的Bt基因cry1C*、cry2A*和cry1Ac/Ab,轉(zhuǎn)育到水稻品種秀水123、湘晴及節(jié)水抗旱稻恢復(fù)系旱恢3號(hào)和保持系滬旱1B中,以獲得新型轉(zhuǎn)Bt基因家系。以自交系BC2F3代水稻葉片為材料,利用分子標(biāo)記輔助選擇、田間除草劑篩選或者試紙條檢測(cè)方法,以獲得

3、新型轉(zhuǎn)Bt基因家系。并在全生育期實(shí)行除不噴施農(nóng)藥外的正常田間管理的轉(zhuǎn)基因植株的田間抗蟲鑒定方法篩選出抗蟲性良好、農(nóng)藝性狀優(yōu)良的家系,為后續(xù)抗蟲育種提供材料。BC2F3代PCR檢測(cè)及試紙條檢測(cè)的結(jié)果顯示分別獲得cry1C*和cry2A*基因的滬旱1B、秀水123和湘晴的純合家系。同時(shí),在田間自然誘發(fā)蟲害條件下,轉(zhuǎn)基因株系對(duì)稻縱卷葉螟蟲表現(xiàn)出強(qiáng)抗性。
　　三、稻褐飛虱是水稻生產(chǎn)中的主要害蟲之一,褐飛虱的爆發(fā)會(huì)嚴(yán)重影響水稻的產(chǎn)量,甚至絕

4、收,挖掘褐飛虱抗性資源和培育抗性品種是減少褐飛虱危害最經(jīng)濟(jì)有效的辦法。
　　由藥用野生稻衍生來(lái)的水稻品系B5對(duì)褐飛虱生物型1和2具有很高的抗性,B5攜帶的抗性基因Bph14和Bph15分別被定位在第3和第4染色體上,我們以B5為抗褐飛虱供體親本,通過(guò)回交與分子標(biāo)記輔助選擇育種技術(shù)將褐飛虱抗性基因?qū)氲诫s交組合的保持系“滬旱1B”和恢復(fù)系“秀水123”“湘晴”“旱恢3號(hào)”。為節(jié)水抗旱雜交稻的培育提供了褐飛虱抗性親本和培育適應(yīng)長(zhǎng)江下游

5、地區(qū)的常規(guī)粳稻品種。實(shí)驗(yàn)中根據(jù)前人研究結(jié)果合成了6對(duì)用于MAS檢測(cè)的標(biāo)記,通過(guò)對(duì)供體親本與受體親本多態(tài)性檢測(cè)分析,選定了分別與Bph14和Bph15緊密連鎖的標(biāo)記Bph14-2和MS5在抗感親本及其雜交回交后代群體中進(jìn)行跟蹤選擇,實(shí)驗(yàn)中用Bph14和Bph15基因選擇標(biāo)記Bph14-2和MS5檢測(cè)了1944份后代材料,通過(guò)分子檢測(cè)得到含有Bph14基因的材料有291份,其中帶型為3的雜合株系18份,帶型為2的純合株系273份。有Bph1