分子標(biāo)記-形態(tài)標(biāo)記在蝦、蟹研究中的應(yīng)用.pdf

1、將分子標(biāo)記、形態(tài)學(xué)標(biāo)記以及其它方法用于蝦、蟹的研究中，分析了不同種群的經(jīng)濟(jì)性狀差異、形態(tài)性狀與體重指標(biāo)的相關(guān)性以及系統(tǒng)發(fā)育和分子鑒定等內(nèi)容。 在使用研制的生態(tài)繁育法培育凡納濱對(duì)蝦親蝦的過(guò)程中，比較了我國(guó)本地養(yǎng)殖凡納濱對(duì)蝦與美國(guó)進(jìn)口凡納濱對(duì)蝦品系部分生產(chǎn)性狀的差異：在溫度較低(28℃)的月份，進(jìn)口蝦比本地蝦平均每只雌蝦日產(chǎn)無(wú)節(jié)幼體量高，但月總產(chǎn)卵量低；在溫度較高(≥31℃)的月份，本地蝦對(duì)高溫的耐受性不如進(jìn)口蝦，在持續(xù)高溫三天后，

2、親蝦攝食量減少50％以上，親蝦產(chǎn)卵量、交配率和孵化率嚴(yán)重下降，而進(jìn)口蝦繁殖力雖然表現(xiàn)出下降趨勢(shì)，但仍能保持一定水平；本地蝦適應(yīng)當(dāng)?shù)氐酿B(yǎng)殖條件及氣候環(huán)境，表現(xiàn)出高于進(jìn)口蝦的交配率、存活率和無(wú)節(jié)幼體總產(chǎn)量；采用AFLP分子標(biāo)記技術(shù)，選擇64對(duì)引物共擴(kuò)增出3340條帶，平均每個(gè)引物對(duì)獲得約53條帶，成功回收并擴(kuò)增出15條差異DNA片段。研究表明，利用本地凡納濱對(duì)蝦對(duì)我國(guó)環(huán)境的較強(qiáng)適應(yīng)性，以選育的進(jìn)口凡納濱對(duì)蝦品系為參考，結(jié)合分子標(biāo)記輔助育種將

3、是獲得我國(guó)高產(chǎn)抗逆凡納濱對(duì)蝦新品系(品種)的有效途徑。 測(cè)得54尾三疣梭子蟹30日齡體重、頭胸甲寬、體高、螯足長(zhǎng)、兩側(cè)額齒間距、第一側(cè)齒間距6個(gè)指標(biāo)，計(jì)算性狀間的相關(guān)系數(shù)，采用通徑分析方法計(jì)算以形態(tài)性狀為自變量對(duì)體重作依變量的通徑系數(shù)，對(duì)各性狀的影響大小進(jìn)行剖分。結(jié)果表明：頭胸甲寬對(duì)體重的直接作用(0.799**)最大，是影響體重的主要因素；螯足長(zhǎng)對(duì)體重的直接作用(0.237**)相對(duì)較小，主要通過(guò)頭胸甲寬的間接作用(0.499

4、)影響體重；多元回歸方程為y=15.616+3.418X1+1.645X3，其中y為體重(g)。X1為頭胸甲寬(cm)，X3為螯足長(zhǎng)(cm)，為三疣梭子蟹選種提供了理論依據(jù)和理想的測(cè)度指標(biāo)。 測(cè)定三疣梭子蟹9個(gè)個(gè)體COI基因部分序列467 bp，8個(gè)個(gè)體16S rRNA基因部分序列519 bp，同時(shí)測(cè)定樣品蟹1個(gè)個(gè)體COI基因部分序列468 bp。結(jié)合GenBank中收集的梭子蟹科COI、16S rRNA兩個(gè)基因所有同源序列信息

5、，使用Kimura雙參數(shù)模型采用鄰接法(NJ)、最大簡(jiǎn)約法(MP)構(gòu)建梭子蟹科分子系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)；將樣品蟹測(cè)得的COI基因序列和已知蟳屬的其它蟹同源序列(429 bp)進(jìn)行比對(duì)分析。結(jié)果分析表明：兩個(gè)基因片段序列平均AT堿基含量都明顯高于GC含量；梭子蟹屬與美青蟹屬關(guān)系最近，蟳屬應(yīng)為區(qū)別于梭子蟹屬、美青蟹屬、青蟹屬的另一支，支持蟳屬應(yīng)劃分在短槳蟹亞科的觀(guān)點(diǎn)；根據(jù)遺傳距離以及轉(zhuǎn)換/顛換(R)值分析，判定出樣品蝠為銳齒蟳。本試驗(yàn)運(yùn)用線(xiàn)粒體基因片