聚維酮高絡(luò)合碘溶液體外殺滅豬精液中病原微生物活性的研究及其對豬精液品質(zhì)和常溫保存的影響.pdf

1、聚維酮高絡(luò)合碘溶液中碘以低毒性的絡(luò)合碘存在，適當(dāng)濃度的碘既能殺滅精液中的細(xì)菌和病毒，又不會傷害精子，能有效阻止細(xì)菌和病毒性傳染病的垂直傳播，大大保障精液的整體質(zhì)量。由于對環(huán)境無污染，可以大幅度增加養(yǎng)殖業(yè)的安全保障。在集約化養(yǎng)殖模式的不斷推廣下，聚維酮高絡(luò)合碘溶液的成功研發(fā)，為阻止病原微生物通過精液的垂直傳播，進而為全國豬病的防治和凈化提供了強有力的保障措施。本課題通過探究聚維酮高絡(luò)合碘溶液對常見病原微生物的體外殺滅試驗，證實其對臨床上常

2、見病原微生物的殺滅效果，進而探討將其應(yīng)用于家畜精液保護方面的適用性及可行性，為其在獸醫(yī)生產(chǎn)中應(yīng)用于豬精液的常溫保存提供理論依據(jù)。
　　1.聚維酮高絡(luò)合碘溶液的體外殺菌試驗
　　為考察聚維酮高絡(luò)合碘溶液的體外殺菌活性，在實驗室條件下通過懸液定量殺菌試驗研究了1∶50、1∶100、1∶200三種稀釋度的供試品溶液對部分腸桿菌科、巴氏桿菌科和革蘭氏陽性球菌的殺滅作用，考察了三種稀釋度作用不同時間的平均殺菌率及殺滅范圍。結(jié)果表明:0

3、.1％卵磷脂+1.0％吐溫80+0.5％硫代硫酸鈉的0.03mol·L-1磷酸鹽緩沖液作為中和劑，可有效中和1∶50稀釋的聚維酮高絡(luò)合碘溶液的殘留作用;在實驗室條件下，1∶50稀釋的聚維酮高絡(luò)合碘溶液對上述細(xì)菌作用5min后殺菌率即可達到100％;1∶100稀釋的聚維酮高絡(luò)合碘溶液對本試驗中的大腸桿菌和沙門氏菌不同菌株作用10min的平均殺菌率均大于99％，對本試驗中的革蘭氏陽性球菌的平均殺菌率均大于99.9％;1∶200稀釋的聚維酮高

4、絡(luò)合碘溶液殺菌效果不理想。由以上試驗結(jié)果可知:低于100倍稀釋倍數(shù)的聚維酮高絡(luò)合碘溶液具有良好的殺菌效果。
　　2.聚維酮高絡(luò)合碘溶液對PRRSV、TGEV體外殺毒作用的研究
　　本試驗研究了聚維酮高絡(luò)合碘溶液和聚維酮碘對Marc-145和PK-15細(xì)胞的毒性作用，同時采用MTT法考察了兩種測試物對PRRSV、TGEV病毒增殖的影響，進行了阻斷、抑制和直接殺滅PRRSV和TGEV效果的試驗。結(jié)果如下:聚維酮高絡(luò)合碘溶液對Ma

5、rc-145和PK-15的最大無毒濃度分別為312.50μg·mL-1和156.25μg·mL-1，聚維酮碘對Marc-145和PK-15細(xì)胞的最大無毒濃度分別為2.44μg·mL-1和1.22μg·mL-1，在安全濃度以下均不會明顯引起細(xì)胞損傷，對細(xì)胞無毒性作用;阻斷試驗結(jié)果表明聚維酮高絡(luò)合碘溶液在安全濃度1.22～312.50μg·mL-1內(nèi)對PRRSV的阻斷作用極顯著(P＜0.01)，在安全濃度1.22～156.25μg·mL-1

6、內(nèi)對TGEV的阻斷作用極顯著(P＜0.01);抑制試驗結(jié)果表明聚維酮高絡(luò)合碘溶液在安全濃度2.44～312.50μg·mL-1內(nèi)對PRRSV在Marc-145細(xì)胞上的增殖具有極顯著的抑制作用(P＜0.01)，在安全濃度4.88～156.25μg·mL-1內(nèi)對TGEV在PK-15細(xì)胞上的增殖具有極顯著的抑制作用(P＜0.01)，直接殺滅試驗結(jié)果表明聚維酮高絡(luò)合碘溶液在濃度范圍0.15～312.50μg·mL-1內(nèi)對PRRSV有極顯著的直接

7、殺滅作用(P＜0.01)，聚維酮高絡(luò)合碘溶液在濃度19.53～156.25μg·mL-1內(nèi)對TGEV有極顯著的直接殺滅(P＜0.01)作用。結(jié)果表明:聚維酮高絡(luò)合碘溶液在安全范圍內(nèi)對兩種病毒的殺滅效果比較明顯，可以為臨床上開發(fā)聚維酮高絡(luò)合碘溶液作為豬精液保護劑從源頭上杜絕精液中疾病的垂直傳播提供參考。
　　3.聚維酮高絡(luò)合碘溶液對公豬精液品質(zhì)和存活時間及存活指數(shù)的影響
　　本試驗通過對公豬精液品質(zhì)、存活時間和存活指數(shù)等指標(biāo)的

8、測定，考察了聚維酮高絡(luò)合碘溶液三種稀釋度(1∶50、1∶100、1∶200)使用后對豬精子質(zhì)量的影響，探究將其應(yīng)用于家畜精液保護的可行性。結(jié)果顯示:1∶100稀釋的聚維酮高絡(luò)合碘溶液對17℃保存的豬精子質(zhì)量的常規(guī)指標(biāo)無影響，精子的有效存活時間可以達到90h，總存活時間最高可達300h，存活指數(shù)最高為105.3，結(jié)果均好于對照的聚維酮碘組，1∶50、1∶200稀釋時精液的保護效果不如1∶100稀釋。結(jié)論:綜合考慮各種因素按劑量1∶100稀