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文檔簡介
1、細菌污染精液影響常溫保存豬精子質(zhì)量和保存時間,同時精液里面含有的致病細菌、病毒等可能通過人工授精垂直傳播給后代,豬精液常溫保存、運輸更加擴大傳播范圍。目前豬精液稀釋采用添加抗生素來殺死細菌或抑制其生長,這存在抗生素濫用導(dǎo)致的細菌耐藥性問題,而本研究期望能建立一種不加或少加抗生素的豬精液稀釋液體系,從而解決抗生素濫用導(dǎo)致的細菌耐藥性問題。通過在豬鮮精和17℃保存精液中添加聚維酮碘(PVP-Ⅰ),探討其殺滅精液有害細菌的效果和對精子質(zhì)量的影
2、響,從而達到阻斷病原菌垂直傳播的目的。保存后不同時間時取樣精液接種和培養(yǎng),用細菌菌落計數(shù)的方法檢測精液里面細菌菌落總數(shù),并用MicroScanA/S4細菌鑒定儀鑒定細菌種類。采用計算機輔助精液分析儀(CASA)檢測精子活率、活力,低滲腫脹法(HOST)檢測質(zhì)膜完整性、線粒體膜電位檢測試劑盒(JC-1)測線粒體活性和考馬斯亮藍染色檢測精子頂體完整性。
本研究結(jié)果如下:(1)用PVP-Ⅰ消毒豬精液時,在0-0.27 mg/ml
3、內(nèi)隨著PVP-Ⅰ濃度的增加殺菌效果越好。(2)從來自廣西桂牧叮原種豬場豬精液里面檢測出變形桿菌、棒狀桿菌、大腸桿菌、不動桿菌、銅綠假單胞菌、白色念珠菌、鏈球菌、表皮葡萄糖球菌,沒有檢出沙門氏菌、克雷伯氏菌。(3)精液里面添加0.20 mg/ml和0.27 mg/ml PVP-Ⅰ能殺死棒狀桿菌、大腸桿菌、不動桿菌、銅綠假單胞菌、白色念珠菌、鏈球菌(作用1 h),但不能殺死變形桿菌。(4)在豬精液稀釋液中添加0-0.20 mg/ml濃度的P
4、VP-Ⅰ對17℃保存豬精子質(zhì)量無影響;(5)0.20 mg/ml:PVP-Ⅰ能適用于豬精液17℃保存的不同稀釋液配方。從上面結(jié)果可以得出以下結(jié)論:聚維酮碘在0.20 mg/ml濃度能殺死豬精液里面的棒狀桿菌、大腸桿菌、不動桿菌、銅綠假單胞菌、白色念珠菌、鏈球菌,并且對17℃保存豬精子質(zhì)量常規(guī)指標(活率、活力、線粒體活性、質(zhì)膜完整性和頂體完整性)無影響。
PVP-Ⅰ對通過豬精液傳播細菌或病毒的殺滅效果需要進一步研究,另外PV
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